[發(fā)明專利]一種紅花釣鐘柳的離體快速繁殖方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510087223.0
• 申請日: 2015-02-25
• 公開（公告）號: CN104663446A
• 公開（公告）日: 2015-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊惠才
• 申請（專利權(quán)）人: 楊惠才
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標(biāo)代理事務(wù)所 45109
• 代理人: 吳安儀

1.一種紅花釣鐘柳的離體快速繁殖方法，其特征在于包括以下步驟：

?（1）叢生芽誘導(dǎo)：選取健壯紅花釣鐘柳植株一年生木質(zhì)化帶芽莖段作為外植體，剪去葉片，切成3.0～5.0cm長的帶有2～3個腋芽的節(jié)段先用0.2%高錳酸鉀溶液浸泡1～3h，再用軟毛刷輕輕刷洗外植體表面將其表面的塵土和部分菌體去除，然后用自來水沖洗1～3h后置于超凈工作臺中，先用75%乙醇消毒5～30s后用無菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒5～15min，用無菌水沖洗4～6次再用無菌濾紙擦干表面的水珠后接種到啟動培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，接種后先在25～28℃條件下全暗培養(yǎng)1～5天，然后置于每天光照10～12小時，光照強(qiáng)度為1500～3000lx，直至誘導(dǎo)形成叢生芽;

（2）繼代培養(yǎng)：將誘導(dǎo)培養(yǎng)得到的叢生芽切割成單個芽并豎直向接種于增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)，接種后先在25～28℃條件下全暗培養(yǎng)1～3天，然后置于每天光照12～14小時，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，置于培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)，多次反復(fù)切割進(jìn)行繼代培養(yǎng)，以得到更多的叢生芽;

（3）生根誘導(dǎo)：將步驟（1）或（2）過程獲得的高度約為1.5～2.5cm的叢生芽芽分切接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，接種后先在25～28℃條件下全暗培養(yǎng)1～3天，然后置于每天光照12～15小時，光照強(qiáng)度為2000～3000lx，培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)至生根;

（4）煉苗移栽：將步驟（3）獲得的高4cm以上的根系發(fā)達(dá)的試管苗培養(yǎng)瓶移出培養(yǎng)室,在室內(nèi)放置3～5天后逐漸打開瓶蓋于自然光照下煉苗5～7天后，將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，洗掉根部培養(yǎng)基，栽入盛有田間土壤的營養(yǎng)杯中，以塑料薄膜覆蓋5～10天后揭去，30天后統(tǒng)計成活率。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紅花釣鐘柳的離體快速繁殖方法，其特征在于步驟（1）所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+1～3mg/L6-BA+0.01～0.5mg/L?NAA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紅花釣鐘柳的離體快速繁殖方法，其特征在于步驟（2）所述的增殖培養(yǎng)基為MS+0.01～0.5mg/LNAA+1～3mg/L?6-BA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紅花釣鐘柳的離體快速繁殖方法，其特征在于步驟（3）所述的生根培養(yǎng)基為：1/2MS+0.1～1mg/L?NAA+0.1～1mg/L?IBA+15～30g/L蔗糖+3.5～6.0g/L瓊脂，pH為5.4～5.8。