[發(fā)明專利]一種鹿角蕨組培快繁的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510087218.X
• 申請(qǐng)日: 2015-02-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104663442A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-06-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊惠才
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 楊惠才
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 玉林市振盛專利商標(biāo)代理事務(wù)所 45109
• 代理人: 吳安儀

技術(shù)領(lǐng)域

????本發(fā)明涉及植物生物技術(shù)中植物組織培養(yǎng)的方法，具體地說(shuō)，涉及一種鹿角蕨組培快繁的方法。

背景技術(shù)

蕨類植物起源于古生代志留紀(jì)和泥盆紀(jì)的裸蕨,全世界約有12000多種。其生活史中有兩個(gè)能獨(dú)立生活的植物體即孢子體和配子體,孢子體世代和配子體世代在蕨類植物生活史中交替出現(xiàn)，孢子體世代在蕨類植物的生活史中占有較大優(yōu)勢(shì)。蕨類植物對(duì)水、熱條件極為敏感,且多數(shù)為陰生植物和附生植物,大部分類群需要森林植被為其提供生存的環(huán)境。中國(guó)由于森林生態(tài)系統(tǒng)類型多樣,因而蕨類植物類群齊全,種類豐富。蕨類植物具有較高的藥用價(jià)值，寫(xiě)信類黃酮、萜類、酚酸等多種結(jié)構(gòu)類型的植物化學(xué)成分,具有抗腫瘤、抗炎、抗HIV、抗氧化、抑菌、保肝、促進(jìn)骨愈合等藥理活性。此外，蕨類已成為觀賞植物中的重要組成部分,在室內(nèi)園藝、公園、庭院等環(huán)境的綠化、插花和工藝品制作等園林園藝事業(yè)中占據(jù)相當(dāng)重要的地位,觀賞蕨類的商品生產(chǎn)和栽培育種事業(yè)也相當(dāng)發(fā)達(dá),蘊(yùn)藏著很大的開(kāi)發(fā)潛力。

鹿角蕨（Platycerium?wallichii）為鹿角蕨科鹿角蕨屬植物,為熱帶季雨林中的附生植物,其葉形別致,形似梅花鹿角,姿態(tài)高雅,別具熱帶情趣,是室內(nèi)立體綠化的首選植物。由于鹿角蕨觀賞期長(zhǎng)和管理方便等優(yōu)點(diǎn),目前國(guó)際上將其作為盆栽觀葉植物應(yīng)用普遍,而我國(guó)才剛剛進(jìn)入開(kāi)發(fā)利用階段,對(duì)鹿角蕨的研究處于起步階段,實(shí)驗(yàn)室組培方面的研究也不夠系統(tǒng)完善。研究表明，鹿角蕨從孢子播種開(kāi)始,直至長(zhǎng)出孢子體的時(shí)間大致為:孢子萌發(fā)需20天;由孢子長(zhǎng)出原葉體需要50天以上;幼孢子體形成則需半年以上，而本發(fā)明建立鹿角蕨的離體再生體系，相對(duì)以孢子開(kāi)始的途徑大大縮短了生長(zhǎng)周期,為鹿角蕨走向商品化生產(chǎn)開(kāi)辟了途徑,對(duì)觀賞蕨類的組織培養(yǎng)具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

????本發(fā)明的目的在于提供出一種鹿角蕨組培快繁的方法，本發(fā)明以鹿角蕨細(xì)嫩孢子葉為外植體，經(jīng)過(guò)外植體消毒、GGB誘導(dǎo)、增殖、分化、生根等過(guò)程建立了鹿角蕨離體組培快繁方法，從而實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的目的。

?本發(fā)明的一種鹿角蕨組培快繁的方法，包括以下的步驟：

?1、一種鹿角蕨組培快繁的方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）外植體消毒：選取健壯鹿角蕨的孢子葉新長(zhǎng)出的嫩葉，用0.1%～0.3%高錳酸鉀溶液浸泡10～30min，無(wú)菌水沖洗3～5次后用70%～80%乙醇浸泡10～20s，用無(wú)菌水清洗3～5次后用0.1%升汞溶液消毒1～5min，再用無(wú)菌水清洗3～5次后備用。

（2）誘導(dǎo)培養(yǎng)：用解剖刀在經(jīng)步驟（1）處理后孢子葉表面進(jìn)行輕微劃傷處理并正面朝上接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行GGB誘導(dǎo)。接種后置于每天光照12～16小時(shí)，光照強(qiáng)度為1500～2500lx，培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)直至形成GGB。

（3）增殖培養(yǎng)：將步驟（2）的獲得的GGB接種到增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)。接種后置于每天光照12～16小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000～2500lx，培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)，每?jī)芍芨鼡Q一次培養(yǎng)基。

（4）GGB分化培養(yǎng)：將步驟（1）或（2）獲得的GGB轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基中進(jìn)行GGB分化培養(yǎng)。接種后置于每天光照12～16小時(shí)，光照強(qiáng)度為2000～2500lx，培養(yǎng)溫度為25～28℃的條件下培養(yǎng)。接種后每?jī)芍芨鼡Q一次培養(yǎng)基。

（5）生根培養(yǎng)：當(dāng)經(jīng)步驟（4）培養(yǎng)鹿角蕨孢子葉伸展,并由最初的長(zhǎng)條狀長(zhǎng)出鹿角且長(zhǎng)度約為1.5～2.5cm時(shí)轉(zhuǎn)移至生根培養(yǎng)中進(jìn)行誘導(dǎo)生根。

上述步驟（2）所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：MS+1.0～4.0mg/L6-BA+1.0～5.0mg/L?NAA+2.0%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂，pH值為5.4～5.8。

上述步驟（3）所述的增殖培養(yǎng)基為：MS+1.0～3.0mg/LKT+0.1～1mg/L?NAA+2.0%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂，pH值為5.4～5.8。

上述步驟（4）所述的分化培養(yǎng)基為：MS+0.5～1.5mg/L6-BA+0.1～0.5mg/L?IBA+2.0%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂，pH值為5.4～5.8。

上述步驟（5）所述的生根培養(yǎng)基為：MS+0.1～1.0mg/L?NAA+0.1～0.5mg/L?IBA+2.0%～3.5%蔗糖+0.35%～0.5%瓊脂，pH值為5.4～5.8。