[發明專利]一種利用益生菌發酵海洋生物制備降血壓肽的方法

在審

• 申請號: 201510084143.X
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104651435A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 周鵬;陳衛;劉小鳴;劉大松;胡錦華
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;A61K38/39;A61P9/12
• 代理公司: 威海科星專利事務所 37202
• 代理人: 王元生

1.一種利用益生菌發酵海洋生物制備降血壓肽的方法，其特征在于，包括如下工藝步驟：

a．原料的選取與預處理：選取富含膠原蛋白的海洋生物海參、海蜇、海地瓜或魷魚為原料，清水浸泡脫除鹽分，洗凈后撈出瀝干水分，使用打漿機進行打漿處理，加入2～30倍體積的純凈水后采用膠體磨進行研磨細化處理，得漿狀物；

b．蛋白酶液化：將步驟a得到的漿狀物加熱至中心溫度達到95～100℃，保持10min，滅除微生物，冷卻到35～55℃，用NaOH和HCl調節pH到2～9，加入蛋白酶進行液化處理，其用量為海洋生物重量的0.5～10‰，酶解1～3h后，將液化液加熱至中心溫度達到95～100℃，保持10min，滅除酶活，得滅酶液化液；

c．初始發酵液的制備：在步驟b得到的滅酶液化液中，按重量百分數0.5～3%加入葡萄糖或蔗糖，用NaOH和HCl調節pH到6.5～7.5，得初始發酵液；

d．益生菌發酵：將步驟c得到的初始發酵液放入空消發酵罐進行實消，空消和實消的條件均為121℃、20min，待罐溫降至37℃，接入益生菌液體發酵劑，該液體發酵劑是將益生菌種按重量百分數0.01～1%接入滅菌的初始發酵液中37℃恒溫搖床密封培養2～4天而成，接種量是初始發酵液體積百分數的0.1～10%，該接種混合液在37℃和100～300rpm攪拌轉速的條件下密封發酵2～5天，發酵液濾去殘渣，得發酵濾液；

e．降血壓肽制品的制備：在步驟d得到的發酵濾液中加入2～10%海藻糖、1～5%麥芽糊精、0.5～2%甘油等冷凍保護劑，-80～-20℃預凍2～6h，然后在-50～-40℃冷阱溫度和＜150Pa真空度的條件下冷凍干燥24～48h，直接得到含活性益生菌與活性肽的復合降血壓肽生物制劑；或者，步驟d得到的發酵濾液采用孔徑為0.1～0.5μm的管式膜脫除大分子，然后采用截留分子量為3kDa的超濾膜截留分級，截留液采用納濾膜濃縮脫鹽，然后在175～185℃進風溫度、75～85℃出風溫度和0.35～0.45MPa噴霧壓力的條件下噴霧干燥，或者在-50～-40℃冷阱溫度和＜150Pa真空度的條件下冷凍干燥24～48h，得到降血壓肽制品。

2.根據權利要求1所述的利用益生菌發酵海洋生物制備降血壓肽的方法，其特征在于，步驟b所述的蛋白酶為木瓜蛋白酶、風味蛋白酶、堿性蛋白酶、菠蘿蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中的一種或多種。

3.根據權利要求1所述的利用益生菌發酵海洋生物制備降血壓肽的方法，其特征在于，步驟d所述的益生菌種為植物乳桿菌、以及干酪乳桿菌、瑞士乳桿菌、雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌中的一種或多種。