[發明專利]一種高精度MS(含碳源)培養基質的規模化制作方法

無效

• 申請號: 201510082565.3
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104719146A
• 公開（公告）日: 2015-06-24
• 發明（設計）人: 錢夕剛
• 申請（專利權）人: 錢夕剛
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

1.一種高精度MS(含碳源)培養基質的規模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述的六個步驟具體操作如下：

①準確計算：將MS基本培養基所含的17種元素擴大1000倍，即鹽酸硫胺素0.1g，二水鉬酸鈉0.25g，煙酸0.5g，鹽酸吡哆醇0.5g，碘化鉀0.83g，甘氨酸2g，硼酸6.2g，七水硫酸鋅8.6g，四水硫酸錳22.3g，乙二胺四乙酸鈉鐵36.5g，肌醇100g，磷酸二氫鉀170g，七水硫酸鎂370g，二水氯化鈣440g，硝酸銨1750g，硝酸鉀1900g，綿白糖30000g；2種元素六水氯化鈷和五水硫酸銅擴大10000倍，即各0.25g；

②精確稱量：按照①中計算的結果準確稱量，尤其是要用萬分之一天平準確稱量各0.25g的六水氯化鈷和五水硫酸銅；

③先少后多地混合：按照量的少多進行先后混合，即按照鹽酸硫胺素，二水鉬酸鈉，煙酸，鹽酸吡哆醇，碘化鉀，甘氨酸，硼酸，七水硫酸鋅，四水硫酸錳，乙二胺四乙酸鈉鐵，肌醇，磷酸二氫鉀，七水硫酸鎂，二水氯化鈣，硝酸銨，硝酸鉀，綿白糖的順序混合均勻，共計34707.78g；

④密封：將混合后的固體基質按照250g每瓶的要求分裝于塑料容器中，并進行密封；

⑤單獨母液制備：六水氯化鈷和五水硫酸銅各稱量0.25g，溶于1L蒸餾水中，配制成10000倍母液；

⑥啟封使用：根據需要，每1L蒸餾水中加入準確稱量的上述固體基質34.7g，加熱待其完全溶解后加入100μL六水氯化鈷和五水硫酸銅的單獨母液，進而加入其它所需試劑即可。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，該高精密度培養基質的規模化制作方法具有以下特點，即不同批次的基質之間無計算誤差；由于17種試劑都擴大了1000倍，2種試劑擴大了10000倍，不同批次的基質之間的稱量誤差極小，精密度高；理論上，由于固體基質每次為1000倍的使用量(以每次1L計算)，即可以配制1000L的上述配方，液體母液每次僅需要100μL，批次內部不會出現因為使用不同廠家、不同時期的試劑而導致的人為誤差；擴大后的固體基質為每250g密封于一個塑料容器中，可避免因天氣、溫度、水分等外界因素影響導致出現液體母液常見的沉淀、發霉等現象，而液體基質僅為兩種元素的混合；擴大10000倍后精密度高；上述的諸多優點都為以該培養基為基質開展的后續試驗，獲得準確的試驗結果奠定基礎。