[發(fā)明專利]一種高精度MT(含碳源)培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510082257.0
• 申請日: 2015-02-16
• 公開（公告）號: CN104642125A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 錢家靜
• 申請（專利權(quán)）人: 錢家靜
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明公開了一種高精度MT(含碳源)培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法，屬于植物生物技術(shù)領(lǐng)域。更具體地說是一種包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟，以期獲得不同批次和批次之間誤差極小的培養(yǎng)基質(zhì)、減少試驗誤差的方法。

背景技術(shù)

植物組織培養(yǎng)技術(shù)或無土栽培技術(shù)通常需要配制培養(yǎng)基母液，即配制擴大一定倍數(shù)、含有各種類型試劑的液體。然而，由于母液含有不同類型試劑，常常分為大量元素、微量元素、鐵鹽和有機元素四大類，而四大類所擴大的倍數(shù)不同，導致藥品使用質(zhì)量不一致，一則容易出現(xiàn)計算誤差；二則藥品的廠家、質(zhì)量不一致，即使計算、稱量一致，也會影響試驗結(jié)果；三則由于母液為液體狀態(tài)，在春夏之交季節(jié)，由于氣溫上升以及濕度增大，極其容易導致母液感染細菌、霉菌，導致母液中呈現(xiàn)不同顏色或出現(xiàn)沉淀的現(xiàn)象，浪費了原料；四則會因稱量者對容器刻度的認知(尤其是微量元素)、儀器精密度的不同而出現(xiàn)較大誤差。

鑒于母液配制的上述缺點，用常規(guī)的母液配制培養(yǎng)基，常常會出現(xiàn)因稱量者、藥品、季節(jié)等因素而導致的試驗結(jié)果失敗或無法重復的現(xiàn)象，極大的影響了運用植物組織培養(yǎng)或無土栽培技術(shù)開展試驗的進程，打擊了試驗者的信心。

發(fā)明內(nèi)容

一種高精度MT(含碳源)培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法，其特征在于，所述的方法中包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟。

根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的六個步驟具體操作如下：

①?????準確計算：將MT基本培養(yǎng)基所含的15種元素擴大1000倍，即煙酸0.5g，鹽酸吡哆醇0.5g，碘化鉀0.83g，甘氨酸2g，硼酸6.2g，七水硫酸鋅8.6g，四水硫酸錳22.3g，乙二胺四乙酸鈉鐵36.5g，肌醇100g，磷酸二氫鉀170g，七水硫酸鎂370g，二水氯化鈣440g，硝酸銨1750g，硝酸鉀1900g，綿白糖30000g；2種元素六水氯化鈷和五水硫酸銅擴大10000倍，即各0.25g；

②?????精確稱量：按照①中計算的結(jié)果準確稱量，尤其是要用萬分之一天平準確稱量各0.25g的六水氯化鈷和五水硫酸銅；

③?????先少后多地混合：按照量的少多進行先后混合，即按照煙酸，鹽酸吡哆醇，碘化鉀，甘氨酸，硼酸，七水硫酸鋅，四水硫酸錳，乙二胺四乙酸鈉鐵，肌醇，磷酸二氫鉀，七水硫酸鎂，二水氯化鈣，硝酸銨，硝酸鉀，綿白糖的順序混合均勻，共計34707.43g；

④?????密封：將混合后的固體基質(zhì)按照250g每瓶的要求分裝于塑料容器中，并進行密封；

⑤?????單獨母液制備：六水氯化鈷和五水硫酸銅各稱量0.25g，溶于1L蒸餾水中，配制成10000倍母液；

⑥?????啟封使用：根據(jù)需要，每1L蒸餾水中加入準確稱量的上述固體基質(zhì)34.7g，加熱待其完全溶解后加入100μL六水氯化鈷和五水硫酸銅的單獨母液，進而加入其它所需試劑即可。

本發(fā)明的有益效果：該高精密度培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法具有以下特點，即不同批次的基質(zhì)之間無計算誤差；由于15種試劑都擴大了1000倍，2種試劑擴大了10000倍，不同批次的基質(zhì)之間的稱量誤差極小，精密度高；理論上，由于固體基質(zhì)每次為1000倍的使用量(以每次1L計算)，即可以配制1000L的上述配方，液體母液每次僅需要100μL，批次內(nèi)部不會出現(xiàn)因為使用不同廠家、不同時期的試劑而導致的人為誤差；擴大后的固體基質(zhì)為每250g密封于一個塑料容器中，可避免因天氣、溫度、水分等外界因素影響導致出現(xiàn)液體母液常見的沉淀、發(fā)霉等現(xiàn)象，而液體基質(zhì)僅為兩種元素的混合。擴大10000倍后精密度高；上述的諸多優(yōu)點都為以該培養(yǎng)基為基質(zhì)開展的后續(xù)試驗，獲得準確的試驗結(jié)果奠定基礎(chǔ)。

具體實施方式：

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步的描述。

本實施例中一種高精度MT(含碳源)(含碳源和固定介質(zhì))固體培養(yǎng)基質(zhì)的規(guī)模化制作方法，包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟。

上述六個步驟具體操作如下：