[發明專利]一種高精度AA(含碳源)培養基質的規模化制作方法無效
| 申請號: | 201510082209.1 | 申請日: | 2015-02-16 |
| 公開(公告)號: | CN104642118A | 公開(公告)日: | 2015-05-27 |
| 發明(設計)人: | 錢家靜 | 申請(專利權)人: | 錢家靜 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00;A01G31/00 |
| 代理公司: | 無 | 代理人: | 無 |
| 地址: | 233100 安徽省滁州市鳳*** | 國省代碼: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高精度 aa 碳源 培養 基質 規?;?/a> 制作方法 | ||
1.一種高精度AA(含碳源)培養基質的規模化制作方法,其特征在于,所述的方法中包括有準確計算、精確稱量、先少后多地混合、密封、單獨母液制備、啟封使用等六個步驟。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,所述的六個步驟具體操作如下:
①準確計算:將高精度AA(含碳源)基本培養基所含的17種元素擴大1000倍,即二水氯化鈣440g,磷酸二氫鉀170g,七水硫酸鎂370g,氯化鉀2940g,碘化鉀0.83g,硼酸6.2g,二水鉬酸鈉0.25g,七水硫酸鋅8.6g,四水硫酸錳22.3g,乙二胺四乙酸鈉鐵36.5g,肌醇100g,鹽酸硫胺素0.5g,甘氨酸75g,L-谷氨酰胺877g,L-天冬氨酸266g,L-精氨酸228g,綿白糖30000g,2種元素六水氯化鈷和五水硫酸銅擴大10000倍,即各0.25g;
②精確稱量:按照①中計算的結果準確稱量,尤其是要用萬分之一天平準確稱量各0.25g的六水氯化鈷和五水硫酸銅;
③先少后多地混合:按照量的少多進行先后混合,即按照二水鉬酸鈉、鹽酸硫胺素、碘化鉀、硼酸、七水硫酸鋅、四水硫酸錳、乙二胺四乙酸鈉鐵、甘氨酸、肌醇、磷酸二氫鉀、L-精氨酸、L-天冬氨酸、七水硫酸鎂、二水氯化鈣、L-谷氨酰胺、氯化鉀、綿白糖的順序混合均勻,共計35540.73g;
④密封:將混合后的固體基質按照250g每瓶的要求分裝于塑料容器中,并進行密封;
⑤單獨母液制備:六水氯化鈷和五水硫酸銅各稱量0.25g,溶于1L蒸餾水中,配制成10000倍母液;
⑥啟封使用:根據需要,每1L蒸餾水中加入準確稱量的上述固體基質35.54g,加熱待其完全溶解后加入100μL六水氯化鈷和五水硫酸銅的單獨母液,進而加入其它所需試劑即可。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,該高精密度培養基質的規模化制作方法具有以下特點,即不同批次的基質之間無計算誤差;由于17種試劑都擴大了1000倍,2種試劑擴大了10000倍,不同批次的基質之間的稱量誤差極小,精密度高;理論上,由于固體基質每次為1000倍的使用量(以每次1L計算),即可以配制1000L的上述配方,液體母液每次僅需要100μL,批次內部不會出現因為使用不同廠家、不同時期的試劑而導致的人為誤差;擴大后的固體基質為每250g密封于一個塑料容器中,可避免因天氣、溫度、水分等外界因素影響導致出現液體母液常見的沉淀、發霉等現象,而液體基質僅為兩種元素的混合;擴大10000倍后精密度高;上述的諸多優點都為以該培養基為基質開展的后續試驗,獲得準確的試驗結果奠定基礎。
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