[發明專利]一種促進微生物細胞轉運葡萄糖、木糖和阿拉伯糖的方法及其在生物基產品發酵中的應用

有效

• 申請號: 201510081668.8
• 申請日: 2015-02-15
• 公開（公告）號: CN104844698B
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發明（設計）人: 田朝光;李金根;蔡鵬麗;王邦;許晶;馬延和
• 申請（專利權）人: 中國科學院天津工業生物技術研究所
• 主分類號: C07K14/37
• 分類號: C07K14/37;C07K14/38;C07K14/39;C12N15/31;C12N15/81;C12N15/80;C12P7/06
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;馬莉華

1.一種宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞的染色體整合有外源的編碼如SEQ IDNO.:2所示的葡萄糖轉運蛋白的多核苷酸；和/或所述宿主細胞含有載體，所述載體包含所述的多核苷酸，所述葡萄糖轉運蛋白具有將葡萄糖自細胞外轉運至細胞內的活性；

并且所述的宿主細胞的染色體還整合有外源的編碼阿拉伯糖轉運蛋白的多核苷酸，或者所述宿主細胞還含有載體，所述載體包含所述的外源的編碼阿拉伯糖轉運蛋白的多核苷酸；其中，所述阿拉伯糖轉運蛋白具有將阿拉伯糖自細胞外轉運至細胞內的活性，并且所述阿拉伯糖轉運蛋白的序列選自SEQ ID NO.:6、8和10；并且，所述的宿主細胞為酵母(Saccharomyces)屬、克魯維酵母菌屬、梭狀芽胞桿菌屬或絲狀真菌。

2.如權利要求1所述的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞的染色體還整合有外源的編碼木糖轉運蛋白的多核苷酸，或者所述宿主細胞還含有載體，所述載體包含所述的外源的編碼木糖轉運蛋白的多核苷酸；其中，所述木糖轉運蛋白具有將木糖自細胞外轉運至細胞內的活性，并且所述木糖轉運蛋白的序列為SEQ ID NO.:4。

3.如權利要求1所述的宿主細胞，其特征在于，所述的酵母屬為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、摩納酵母(Saccharomyces monacensis)、貝酵母(Saccharomyces bayanus)、巴氏酵母(Saccharomyces pastorianus)、卡氏酵母(Saccharomyces carlsbergensis)或裂殖酵母(Saccharomyces pombe)。

4.如權利要求1所述的宿主細胞，其特征在于，所述克魯維酵母菌屬(Kluyveromyces)為馬克斯克魯維酵母(Kluyveromyces marxiamus)、乳酸克魯維酵母(Kluyveromyceslactis)、或脆壁克魯維酵母(Kluyveromyces fragilis)。

5.如權利要求1所述的宿主細胞，其特征在于，所述梭狀芽孢桿菌屬(Clostridiumsp.)為梭熱桿菌(Clostridium thermocellum)、拜氏梭菌(Clostridium beijerinckii)、或丙酮丁醇梭桿菌(Clostridium acetobutylicum)；

所述絲狀真菌為嗜熱側孢霉(Sporotrichum thermophile)或粗糙脈孢菌(Neurosporacrassa)。

6.一種如權利要求1-5中任一所述宿主細胞的用途，其特征在于，(i)用于將己糖自細胞外轉運至細胞內；和/或(ii)用于制備乙醇。

7.一種促進宿主細胞轉運戊糖的方法，其特征在于，包括步驟：在戊糖的存在下，培養權利要求1所述的宿主細胞，其中所述的戊糖為阿拉伯糖和/或木糖。

8.如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述的方法用于制備乙醇，并且所述方法還包括將培養物中的乙醇分離和提純的步驟。

9.如權利要求7所述的方法，其特征在于，當所述宿主細胞還表達SEQ ID NO.:6所示的多肽時，還將戊糖自細胞外轉運至細胞內，所述的戊糖為木糖。

10.如權利要求7所述的方法，其特征在于，當所述的宿主細胞還表達SEQ ID NO.:6所示的多肽時，還將戊糖自細胞外轉運至細胞內，所述的戊糖為阿拉伯糖和木糖。

11.如權利要求7所述的方法，其特征在于，當所述的宿主細胞表達SEQ ID NO.:4所示的多肽時，還將戊糖自細胞外轉運至細胞外，所述的戊糖為阿拉伯糖和木糖。

12.如權利要求7所述的方法，其特征在于，在己糖和戊糖存在下，培養權利要求1所述的宿主細胞，其中，所述的己糖為葡萄糖。