[發明專利]一種卷枝毛霉DK1菌株及其應用

有效

• 申請號: 201510080721.2
• 申請日: 2015-02-15
• 公開（公告）號: CN104726346B
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 丁若垚;郁崇文;張興群;原月夢;孔德枝;常慧
• 申請（專利權）人: 東華大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;D01C1/04;D01C1/00;C12R1/785
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所31233
• 代理人: 黃志達

技術領域

本發明屬于生物紡織技術領域，特別涉及一種卷枝毛霉DK1菌株及其應用。

背景技術

卷枝毛霉在土壤、糞便、禾草及空氣等環境中存在。在高溫、高濕度以及通風不良的條件下生長良好。卷枝毛霉的用途很廣，可以產生果膠酶、木聚糖酶、漆酶、凝乳酶等。常用的毛霉主要有魯氏毛霉和總狀毛霉。腐生，廣泛分布于植物殘體、腐敗有機物、動物糞便和土壤中。

在麻的初加工中，需要通過一種漚麻過程來預先處理部分膠質(主要是果膠和半纖維素)。漚麻過程實際上應用了傳統的微生物技術，它是通過微生物和酶的協同作用緩慢地去除附著在纖維表面非纖維素膠質的過程。漚麻過程對麻纖維質量影響很大，常用的漚麻方式有雨露漚麻和酶法漚麻。

此外，紡織加工中，必須進一步經過煮煉脫膠，即去除果膠、半纖維素和木質素等非纖維素物質(統稱為膠質)，才能獲得用于輕紡的纖維，實現其使用價值。目前，麻行業常用的煮練方法主要是化學方法和酶法脫膠，化學脫膠工藝耗能大，設備損耗大，且排放的廢水無法循環利用，污染問題嚴重。酶法脫膠就是將脫膠菌培養到菌生長的衰老期后進行過濾或離心等處理，再用得到的粗酶液浸漬原麻。粗酶液可以將麻纖維中的果膠、半纖維素、木質素等物質分解轉化為簡單的低分子物質，從而完成麻纖維的脫膠過程。酶法脫膠工藝無需專用設備，快速高效，無污染，生產的精干麻質量好。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種卷枝毛霉DK1菌株及其應用，該菌株生長周期短，菌種不易被污染，處理成本低，處理后纖維質量好，處理環境溫和，耐熱性能好，無環境污染等優點；能夠直接用于亞麻、黃麻、紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖維分散率高，脫膠效率高。

本發明的一種卷枝毛霉DK1菌株，其ITS序列如SEQ ID NO:1所示。

根據ITS測序Blast及聚類分析結果，該菌與卷枝毛霉相似性為99％，結合生理生化試驗結果和鏡檢分析，命名此菌株為卷枝毛霉(Mucor circinelloides)DK1菌株。ITS測序中，所采用的正向引物為：ITS1(5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3’)、反向引物為ITS4(5’-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3’)，均為國際通用引物，由上海生工生物工程技術服務有限公司合成。

本發明所采用的卷枝毛霉(Mucor circinelloides)DK1菌株，保藏單位名稱：CGMCC中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏號為CGMCC NO.10143，保藏日期為2014年12月15日。建議分類命名為：卷枝毛霉(Mucor circinelloides)。

本發明的一種卷枝毛霉DK1菌株的應用，所述菌株應用于漚麻制備亞麻、黃麻、紅麻或竹纖維。

所述具體漚麻工藝包括：

(1)卷枝毛霉DK1菌株保存于PDA培養基，添加凍存緩沖液；

(2)在滅菌冷卻后的PDA培養基中，接入步驟(1)所得的菌一環，在轉速200～400rpm，30～40℃下搖瓶培養24～36小時；

(3)將搖瓶培養后的PDA培養基接種入亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維發酵培養基，在轉速200r/min、溫度30℃條件下搖瓶培養24小時得到發酵菌液；

(4)準備漚麻池；

(5)將制備的發酵菌液使用噴淋法噴灑到亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維上做漚麻處理，漚麻后制得供紡織制品用亞麻、黃麻、紅麻或竹纖維，漚麻條件為自然溫度，pH自然；噴淋法的工藝具體為每48小時向漚麻區域噴灑菌液8ml。

所述步驟(1)中的凍存緩沖液每100ml的配方為：磷酸二氫鉀0.1g，磷酸氫二鉀0.02g，檸檬酸鈉0.06g，七水合硫酸鎂0.03g，甘油12ml，加水定容至100ml，制得。

所述步驟(3)中的亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維發酵培養基配方為：亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維25g，以亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維的質量為基準，氯化鉀的質量分數為1％，磷酸氫二鉀的質量分數為2％，硫酸鎂的質量分數為1％，硫酸亞鐵的質量分數為0.02％，硫酸銨的質量分數為10％，補水至5000ml定容。

本發明的一種卷枝毛霉DK1菌株的應用，所述菌株應用于對亞麻、黃麻、紅麻或竹紗線的煮練。

所述煮練工藝包括：

(1)卷枝毛霉DK1菌株保存于PDA培養基，添加凍存緩沖液；