[發明專利]不同層級嚴重吸入性損傷動物模型的建立方法

無效

• 申請號: 201510076612.3
• 申請日: 2015-02-12
• 公開（公告）號: CN104605956A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發明（設計）人: 童亞林;朱富軍;詹球;龔震宇;馮小艷;劉亮;梁靜;陽齊瓊;李泳;呂璐;莫永亮
• 申請（專利權）人: 童亞林
• 主分類號: A61D1/00
• 分類號: A61D1/00
• 代理公司: 桂林市持衡專利商標事務所有限公司 45107
• 代理人: 唐智芳

技術領域

本發明涉及一種不同層級嚴重吸入性損傷動物模型的建立方法，屬于動物模型的構建技術領域。

背景技術

嚴重吸入性損傷、感染以及MODS(多器官功能障礙綜合征)是導致燒傷患者死亡最主要的三因素，其中嚴重吸入性損傷不僅易誘發ALI/ARDS(急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征)，也極易引起肺部進而全身感染，如病情進入中后期則難以避免的出現肺纖維化，當病情仍然得不到控制最終將發展成為MODS，不難看出，在嚴重吸入性損傷—ALI/ARDS—肺部及全身感染—(肺纖維化)—MODS這一病情發展模式中，嚴重吸入性損傷成為最重要的啟動因素或罪魁禍首，誠如研究資料指出，單純吸入性損傷這一獨立因素就使燒傷患者的病死率增加20％左右，重度吸入性損傷患者死亡率則可高達60～80％，因此重度吸入性損傷已成為嚴重影響燒傷救治成功最重要的因素。

目前國內外將左右主支氣管至肺泡這一廣泛區域的損傷歸入重度吸入性損傷。然而當不同級別(部位)支氣管(如：大氣道的葉、段支氣管，小氣道的小、細、終末支氣管與呼吸區的呼吸性支氣管)與肺泡損傷后，會造成以損傷支氣管為中心的不同區域范圍內相鄰的肺泡與支氣管的損傷(劉群,鄧詩琳,王玉蓮,等.纖維支氣管鏡診斷和治療吸入性損傷[J].中華整形外科雜志,1999,15(3):218)，所引起的病理以及病理生理變化、肺部及全身并發癥(如ALI/ARDS、肺部及全身感染、肺纖維化和MODS等)發生時間與發生率、治療措施(如呼吸機、ECMO的使用時機及使用時間等)以及死亡率等方面存在明顯差別，也使各單位基于現有重度吸入性損傷診斷標準所開展的診斷與救治方面的基礎與臨床研究結果缺乏可比性和指導意義(Woodson?LC.Diagnosis?and?grading?of?inhalation?injury[J].J?Burn?Care?Res,2009,30(1):143-145)。為了更加科學和準確的開展重度吸入性損傷發病機制、治療方案以及傷后預測等方面的研究，申請人提出了將原有重度吸入性損傷進一步分層為嚴重、危重與極危重吸入性損傷的假設，并提出了構建不同層級嚴重吸入性損傷動物模型的方法。

發明內容

本發明要解決的技術問題是在原有重度吸入性損傷基礎上提供了一種更加科學的細化的不同層級嚴重吸入性損傷動物模型的建立方法。該方法通過控制動物對同樣壓力和溫度蒸汽的吸入時間，將重度吸入性損傷進一步分層為嚴重、危重與極危重吸入性損傷，方法簡單易操作，建立的三個層級的嚴重吸入性損傷動物模型穩定可靠。

本發明所述的不同層級嚴重吸入性損傷動物模型的建立方法，其特征在于包括以下步驟：

1)麻醉動物，將動物固定于手術臺上，解剖并顯露右頸內靜脈或左頸內靜脈以及右股動脈或左股動脈，分別置入中心靜脈導管和動脈導管，然后將中心靜脈導管和動脈導管分別與監護儀連接；

2)在動物頸正中、環狀軟骨下行氣管切開，插入氣管導管；

3)在動物右頸內靜脈或左頸內靜脈注射維庫溴銨，并按48～52ml/h輸注乳酸鈉林格氏液，待動物呼吸停止后，采用燙傷儀向動物氣管內通入壓力與溫度分別為0.02MPa/cm²、105℃的蒸氣，并按照0.25s、0.5s、1s的燙傷時間分別致傷動物，致傷后立即接呼吸機控制呼吸20min；在按48～52ml/h的量輸注乳酸鈉林格氏液1h后改按13～17ml/h的量繼續輸注乳酸鈉林格氏液，即建立得到嚴重、危重與極危重三個不同層級嚴重吸入性損傷動物模型。

本申請中所述的動物是兔，優選采用新西蘭大白兔。所有的動物在麻醉前需要進行建立燙傷模型前的常規準備工作，如先將動物各手術部位進行脫毛等處理。通常采用8％的硫化鈉對動物進行脫毛，脫毛24h后進行麻醉操作。對動物進行麻醉所采用的方法與現有技術相同，本申請中的實驗兔是采用1％戊巴比妥鈉按60mg/kg體重進行腹腔注射。

上述方法的步驟1)中，在右頸內靜脈或左頸內靜脈中置入中心靜脈導管(具體為雙腔中心靜脈導管)，在右股動脈或左股動脈中置入和動脈導管，所述的中心靜脈導管和動脈導管分別通過監護儀上的相應連接線與監護儀連接，或者是分別通過壓力換能器再與監護儀連接。以新西蘭大白兔為例，優選是采用5F雙腔中心靜脈導管以及3F動脈導管。

上述方法的步驟2)中，所述的氣管導管優選采用金屬氣管導管。氣管導管內口徑大小與動物的氣管及呼吸機能夠相互配合，以新西蘭大白兔為例，優選是采用內徑為5mm的氣管導管。