[發明專利]一種葡萄花細胞提取物的提取方法及其應用

在審

• 申請號: 201510073844.3
• 申請日: 2015-02-11
• 公開（公告）號: CN104622756A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發明（設計）人: 陳海佳;王一飛;葛嘯虎;麥錦連;馬巖巖
• 申請（專利權）人: 廣州賽萊拉干細胞科技股份有限公司
• 主分類號: A61K8/97
• 分類號: A61K8/97;A61Q19/08;A01H4/00
• 代理公司: 廣州圣理華知識產權代理有限公司 44302
• 代理人: 頓海舟;陳業勝

技術領域

本發明涉及植物提取技術領域，具體涉及一種提取葡萄花細胞提取物的方法及將該提取物在護膚品中應用。

背景技術

葡萄屬植物全世界有60余種，分布于溫帶和亞熱帶。葡萄是著名的水果和釀酒原料，在世界各地栽培的歷史悠久。研究發現，葡萄屬植物中含有大量的營養成分和非營養活性成分，如糖、蛋白質、維生素、氨基酸、微量元素、鞣質、芪類、萜類、黃酮、有機酸、甾類等，主要有抗氧化、抗動脈硬化、抗血栓、抗胃潰瘍、抗菌、抗炎、抗癌等活性。

葡萄的果、根、藤均可入藥，果可解表透疹、利尿解毒，根、藤可祛風濕、止血、消食、解毒、安胎，外用可治療傷筋骨折。在中國傳統醫學中，葡萄常作為補氣藥，《神農本草經》曾記載其果實有“益氣倍力，強志，令人肥健”的功效。但葡萄花的應用卻少之又少，在美容護膚上的使用更是未有發現，但葡萄花含有豐富的的花青素苷等，具有很強的抗氧化作用，是理想的美容抗衰成分。

要推廣使用葡萄花的活性物質，必須能夠有效地提取到大量的葡萄花提取物。現有植物提取一般是采用植株進行提取，但植株生長需要多年時間，而且受到地域，氣候，季節以及病蟲害等的影響與威脅，其提取物品質不穩定，其效果難以控制。因此，研究如何獲取大量的品質穩定的葡萄花提取物是推廣應用葡萄花提取物必須解決的難題。

發明內容

本發明的目的在于克服上述現有技術的缺陷，提供一種葡萄花細胞提取物的提取方法，該方法能夠高效地獲取大量品質穩定的葡萄花提取物。

發明人經研究發現，對葡萄花進行組織培養后體獲得的葡萄花細胞提取物同樣含有葡萄花提取物的成分，同樣具有很強的抗氧化作用，是理想的美容抗衰老用品，因此，本發明的技術原理是：

采集新鮮的葡萄花進行清洗，然后接種在MS培養基中進行黑暗培養，直至長出愈傷組織再進行傳代培養，獲得葡萄花細胞株做為提取葡萄花提取物的原料，再提取葡萄花細胞提取物。

本發明具體的技術方案如下：

一種葡萄花細胞提取物的提取方法，其包括以下步驟：

(1)采集葡萄花花蕾，清洗干凈；

(2)將葡萄花花蕾接種到MS培養基中黑暗培養；

(3)待長出愈傷組織后進行傳代培養；

(4)收集傳代擴增后的葡萄花細胞，經冷凍干燥后磨成粉末。

優選地，步驟(1)選取無核白的小花蕾，用水沖洗后，用酒精消毒，再用無菌水沖洗，然后用NaClO溶液浸泡，最后再用無菌水沖洗。

優選地，所述MS培養基為MS+2，4-D?1.0(mg·L-1)+6-BA?1.126(mg·L-1)。

優選地，步驟(2)黑暗培養的溫度為25℃恒溫培養。

優選地，步驟(3)傳代培養的周期為每四周傳代一次，傳代培養以40ml培養基1～2g細胞傳代。

優選地，步驟(4)研磨的粉末過40目篩。

發明人經研究發現，上述葡萄花細胞提取物具有較強的抗氧化作用，且對皮膚無刺激，因此，本發明還提供了葡萄花細胞提取物的用途，將葡萄花細胞提取物應用在護膚品中。

優選地，所述護膚品為面膜、面箱、潔面乳、爽膚水、乳液、精華素、眼箱。

優選地，所述護膚品為抗衰老護膚品。

與現有技術相比，本發明的有益效果是：

1、本發明通過接種葡萄花進行組織培養來為獲取葡萄花細胞提取物提供原材料，原材料不再受地域、氣候等自然條件限制，而且化學性質穩定，為推廣應用葡萄花提取物奠定了基礎。

2、本發明的葡萄花細胞提取物具有較強的抗氧化能力，對皮膚無刺激，適合應用于護膚品中，尤其是抗衰老的護膚品中。

附圖說明

圖1為DPPH法測定葡萄花細胞提取物及葡萄花提取物清除自由基的能力的結果圖；

圖2為用TUNEL法測定葡萄花細胞提取物及葡萄花提取物對人真皮成纖維細胞生長的影響的結果圖。

具體實施方式

下面通過具體實施例子對本發明做進一步詳細闡述，以便清楚理解本發明所要保護的技術方案。

實施例1??葡萄花細胞提取物的提取方法