[發明專利]一種種皮與纖維組織特異性表達啟動子SFS及其應用

有效

• 申請號: 201510073571.2
• 申請日: 2015-02-11
• 公開（公告）號: CN104651367B
• 公開（公告）日: 2017-09-08
• 發明（設計）人: 左開井;鄧婷;韓慧超;王俊
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12N15/11;C12N15/82;C12N15/10;C12N1/21
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司31236
• 代理人: 郭國中

1.一種核苷酸SFS，其特征在于，其序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一組用于擴增根據權利要求1所述核苷酸SFS的外側引物對，其特征在于，所述外側引物對的序列如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示。

3.一組用于擴增根據權利要求1所述核苷酸SFS的內側引物對，其特征在于，所述內側引物對的序列如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5所示。

4.一種重組載體，其特征在于，包含根據權利要求1所述的核苷酸SFS。

5.一種轉化體，其特征在于，包含根據權利要求1所述的核苷酸SFS。

6.一種根據權利要求1所述的核苷酸SFS作為啟動子的用途。

7.一種根據權利要求1所述的核苷酸SFS的制備方法，其特征在于，包括人工合成法或生物克隆法。

8.根據權利要求7所述的核苷酸SFS的制備方法，其特征在于，所述人工合成的方法具體為：

步驟一、根據核苷酸SFS的正鏈和副鏈序列，分別合成出長度150～200bp、具有粘性末端的單鏈寡核苷酸正鏈片段和單鏈寡核苷酸副鏈片段；

步驟二、將所述單鏈寡核苷酸正鏈片段和單鏈寡核苷酸副鏈片段分別退火，形成帶有粘性末端的雙鏈寡核苷酸片段；

步驟三、混合所述雙鏈寡核苷酸片段，經T4DNA連接酶催化組裝成一個完整的核苷酸SFS。

9.根據權利要求7所述的核苷酸SFS的制備方法，其特征在于，所述生物克隆法具體為：

步驟1、提取棉花DNA；

步驟2、以所述DNA為模板，依次用權利要求2所述的外側引物、權利要求3所述的內側引物進行擴增；

步驟3、將所述擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳檢測，即得核苷酸SFS。