[發明專利]一種小麥種子高分子量谷蛋白亞基檢測樣品的制備方法

有效

• 申請號: 201510073536.0
• 申請日: 2015-02-11
• 公開（公告）號: CN104655464B
• 公開（公告）日: 2017-06-23
• 發明（設計）人: 張平平;馬鴻翔;姚金保;張鵬;楊丹;王化敦
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司32200
• 代理人: 張素卿

1.一種小麥種子高分子量谷蛋白亞基檢測樣品的制備方法，其特征在于：在96孔微孔板中一步提取，96孔微孔板為實驗室通用的容積為200uL的PCR擴增用微孔板，該微孔板配有塑料聯排孔蓋和每孔1粒直徑2mm的鋼珠，其步驟包括：在小麥種子無胚端切取其體積的1/4～1/5，置于200uL的96孔PCR擴增用微孔板中，并在每個微孔中放入1粒直徑2mm的鋼珠；隨后在微孔板中加入40uL浸泡緩沖液靜置過夜，再加入120uL提取緩沖液，經高通量研磨器研磨后，在60℃的烘箱靜置，期間每靜置14min，漩渦震蕩一次1min，兩次共30min，微孔板經離心后所得上清液為小麥高分子量谷蛋白亞基檢測所需樣本；

其中

浸泡緩沖液：25％正丙醇+0.04M Tris-HCl PH8.0；

提取緩沖液：25％正丙醇+0.04M Tris-HCl PH8.0+3.0％SDS+1.3％DTT+2.0％4-VP；

碾磨使用高通量組織碾磨儀，碾磨頻率為30次/s，碾磨時間為2min；微孔板離心條件為4000rpm×15min。