[發(fā)明專利]利用生物轉(zhuǎn)化技術(shù)從丹參地上莖葉中高效制備丹參酚酸類成分的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510070147.2
• 申請(qǐng)日: 2015-02-10
• 公開（公告）號(hào): CN104611373A
• 公開（公告）日: 2015-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 宿樹蘭;段金廒;江曙;嚴(yán)輝;郭盛;錢大瑋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): C12P1/04
• 分類號(hào): C12P1/04;A61K36/537;A61P9/00;A23L1/29
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 楊海軍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種丹參地上莖葉資源化利用方法，具體涉及一種從一定生長(zhǎng)期的丹參地上莖葉經(jīng)光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化后提取制備丹參酚酸類成分的方法及其制備得到丹參酚酸類成分和用途。

背景技術(shù)

丹參(Salvia?miltiorrhizaBge.)為唇形科鼠尾草屬植物。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。其根及根莖入藥稱為丹參，其味苦，性微寒，具有活血祛瘀、通經(jīng)止痛、清心除煩、涼血消癰的功效。現(xiàn)代臨床多用于治療心腦血管疾病、心絞痛等。

我國(guó)藥用丹參資源豐富，包括野生丹參和栽培丹參，每年年產(chǎn)量達(dá)5000～7000t。但除根及根莖藥用外，其地上莖葉、花等資源，并未得到產(chǎn)業(yè)化開發(fā)利用。目前雖有開展相關(guān)研究和開發(fā)的報(bào)道，但并未真正有效利用地上部分資源，因此丹參資源的綜合高效利用逐漸引起廣大科研工作者的關(guān)注和重視，

現(xiàn)代研究表明丹參中丹參酚酸類成分為其主要的活性成分，具有強(qiáng)心、抗血栓形成、改善微循環(huán)、促進(jìn)組織的修復(fù)與再生、抑制過度增生、保肝、抗菌、降血脂等多種生物活性，廣泛應(yīng)用于心腦血管疾病的治療。

光合細(xì)菌(Photosynthetic?bacteria，簡(jiǎn)稱PSB)是一類以光作為能源進(jìn)行光合作用而不產(chǎn)氧的特殊生理類群的總稱，其種類繁多，生長(zhǎng)繁殖快速，酶系豐富。沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonas?palustris,Rps.Palustris)屬于紫色非硫桿菌，它是一種適應(yīng)能力很強(qiáng)的光合細(xì)菌，被應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、漁業(yè)、環(huán)保、醫(yī)藥等領(lǐng)域。該屬細(xì)菌一般為光能異養(yǎng)型，能利用有機(jī)酸、氨基酸及糖類作為光合作用的氫供體或合成細(xì)胞的碳源。PBS的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)條件溫，處理法的流程工藝簡(jiǎn)單，處理成本低，能穩(wěn)定運(yùn)行，且不產(chǎn)生二次污染，因而有望成為生物法處理植物次生代謝產(chǎn)物的首選菌種之一。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題，是基于資源價(jià)值最大化原理，提供一種從一定生長(zhǎng)期的丹參地上莖葉中制備丹參酚酸類成分的方法，其工藝新穎，流程簡(jiǎn)單，并可實(shí)現(xiàn)丹參地上莖葉的資源化利用，具有重要的應(yīng)用價(jià)值和生態(tài)效益。

技術(shù)方案：為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種丹參酚酸類成分，它由下列方法制備得到：

(1)取丹參地上莖葉作為原料，采用水或醇溶液提取，得到水或醇提取液；

(2)取步驟(1)的提取液在無菌條件下，接種提取液1/10～1/20體積的光合細(xì)菌菌液，在400-3200LUX光照厭氧條件下培養(yǎng)3～20天，制成光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化丹參培養(yǎng)液，將光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化丹參培養(yǎng)液在1000-10000r/min離心；

(3)取步驟(2)離心上清液，上大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，先用水洗，然后采用不同濃度乙醇進(jìn)行洗脫分離；

(4)收集步驟(3)體積濃度為20～70％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥，得到總丹參酚酸類成分。

作為優(yōu)選方案，以上所述的丹參酚酸類成分，所述的光合細(xì)菌優(yōu)選如下：紅螺菌屬Rhodospirillium為深紅紅螺菌(Rhodospirillium?rubrum)；紅假單胞菌屬Rhodopseudomonas為沼澤紅假單胞菌(Rhodopseudomonaspalustris)、綠色紅假單胞菌(Rhodopseudomonas?viridis)、綠硫紅假單胞菌(Rhodopseudomonas?sulfoviridis)、海洋紅假單胞菌(Rhodopseudomonas?marina)；紅細(xì)菌屬Rodobacter為球形紅細(xì)菌(Rhodobacter?sphaeroides)、莢膜紅細(xì)菌(Rhodobacter?capsulatus)。

本發(fā)明提供到從丹參地上莖葉中提取制備丹參酚酸類成分的方法，其包括如下步驟：

(1)取丹參地上莖葉作為原料，采用水或醇溶液提取，得到水或醇提取液；

(2)取步驟(1)的提取液在無菌條件下，接種提取液1/10～1/20體積的光合細(xì)菌菌液，在400-3200LUX光照厭氧條件下培養(yǎng)3～20天，制成光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化丹參培養(yǎng)液，將光合細(xì)菌轉(zhuǎn)化丹參培養(yǎng)液在1000-10000r/min離心；

(3)取步驟(2)的上清液，上大孔吸附樹脂柱進(jìn)行吸附，先用水洗，然后采用不同濃度乙醇進(jìn)行洗脫分離；

(4)收集體積濃度為20～70％乙醇洗脫液，減壓濃縮，噴霧干燥，得到總丹參酚酸類成分。