[發明專利]參與人體細胞電離輻射應激反應的長鏈非編碼RNA及其應用

有效

• 申請號: 201510067989.2
• 申請日: 2015-02-09
• 公開（公告）號: CN104673797B
• 公開（公告）日: 2018-02-02
• 發明（設計）人: 周光明;李朋飛;裴海龍;胡文濤;李冰燕;黑國慶
• 申請（專利權）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/68;A61K48/00;A61K31/7105;A61P35/00
• 代理公司: 杭州千克知識產權代理有限公司33246
• 代理人: 冷紅梅

(一)技術領域

本發明涉及一種電離輻射敏感的長鏈非編碼RNA，具體是一種參與人體細胞電離輻射應激反應的長鏈非編碼RNA及其應用。

(二)背景技術

隨著人類對自身細胞中的DNA和RNA功能的深入研究，以前被認為不具有編碼蛋白功能的“垃圾”RNA片段被逐漸揭示出在人體生理機能中的重要功能。有一類不具有編碼蛋白質能力的RNA片段，每個片段大于200個堿基，被定義為長鏈非編碼RNA，即lncRNA。lncRNA的表達受到發育調控，是組織和細胞特異的。相當一部分lncRNA只位于細胞核內。它們包含許多類型的轉錄本，在結構上類似mRNA，有時也轉錄成編碼基因的反義轉錄本。lncRNA被認為執行了重要的調控功能，也與疾病發展息息相關。lncRNA可通過與DNA或RNA結合或與蛋白結合而行使其功能。一些lncRNA實際上是某些調控RNA(如microRNA或piwiRNA)的前體。與miRNA不同的是，lncRNA沒有一種普遍的作用模式，它以許多不同的方式來調控基因表達和蛋白合成。研究發現，一些lncRNA參與了基因調控的基本過程，包括染色質修飾和結構以及直接的轉錄調控。基因調控可能以順式(cis)或反式(trans)發生。lncRNA的轉錄后功能包括調控RNA加工事件，如剪接、編輯、定位、翻譯和降解。近幾年，越來越多的lncRNA被科學家發現并進行研究。現在，生物科學領域已經確認lncRNA參與了細胞凋亡，表觀遺產，X染色體失活，癌癥的發生和轉移，間充質干細胞轉化等多個重要的生物學過程。此外，研究還發現lncRNA在多種癌癥中差異表達，包括白血病、乳腺癌、肝癌、結腸癌和前列腺癌。lncRNA失調的其他疾病還包括心血管疾病、神經系統疾病和免疫介導的疾病。但是，在人體細胞受到電離輻射后產生的應激反應這個重要的生物學過程中是否也有lncRNA的參與，還沒有被證明。

(三)發明內容

本發明目的是提供一種新發現的參與人體細胞電離輻射應激反應的長鏈非編碼RNA及其應用。

本發明的技術方案如下：

一種參與人體細胞電離輻射應激反應的長鏈非編碼RNA，其轉錄本具有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

SEQ ID No.1序列如下：

由于核苷酸序列的特殊性，任何SEQ NO：1所示多核苷酸的變體，只要其與該多核苷酸具有90％以上同源性，且具有相同的功能，則均屬于本發明保護范圍之列。所述多核苷酸的變體是指一種具有一個或多個核苷酸改變的多核苷酸序列。此多核苷酸的變體可以使生的等位變異體或非生的變異體，包括取代變異體、缺失變異體和插入變異體。如本領域所知的，等位變異體是一個多核苷酸的替換形式，它可能是一個多個核苷酸的取代、缺失或插入，但不會從實質上改變其功能。

本發明還涉及所述的長鏈非編碼RNA作為人體電離輻射檢測標志物的應用。本發明的核苷酸片段在人體細胞中普遍存在，可以根據核苷酸序列設計引物，使用PCR儀擴增出這個核苷酸片段，在細胞受到電離輻射后提取細胞的總RNA，進行定量PCR實驗可以檢測出這個核苷酸片段的表達水平變化。

具體的，所述長鏈非編碼RNA用于制備鑒別不同輻照類型的生物學探測器。

本發明還涉及所述的長鏈非編碼RNA在制備抗腫瘤藥物中的應用。

具體的，所述長鏈非編碼RNA可用于制備誘導腫瘤細胞凋亡或抑制腫瘤細胞增殖的藥物。

本發明的有益效果主要體現在：本發明提供了一種新的參與人體細胞電離輻射應激反應的長鏈非編碼RNA，為進一步開發人體受到電離輻射后檢測的生物標志物提供了目標RNA片段，也為研究人體細胞受到輻射后發生損傷的信號通路研究提供了候選lncRNA，實驗發現該基因可以誘導細胞凋亡、抑制增殖，提示其在腫瘤治療方面可能有一定的應用前景，為新的腫瘤藥物篩選提供了基礎。

(四)附圖說明

圖1為4種lncRNA在HeLa細胞受到2Gy X射線輻照后的表達水平變化；

圖2為4種lncRNA在HeLa細胞受到2Gy碳離子輻照后的表達水平變化；

圖3為2Gy不同種類輻照誘導XLOC_023611的表達動力學曲線；A：HeLa細胞；B：92-1細胞；C：A375細胞；

圖4為HeLa細胞轉染XLOC_023611后細胞的增殖受到顯著抑制；

圖5為HeLa細胞轉染XLOC_023611后細胞發生凋亡。

(五)具體實施方式