[發(fā)明專利]一種海馬胰蛋白酶酶解液及其作為抗氧化劑的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510067879.6
• 申請日: 2015-02-10
• 公開（公告）號: CN104689294A
• 公開（公告）日: 2015-06-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李敏晶;王旭瑩;孔亮;李偉;靳艷
• 申請（專利權(quán)）人: 大連海洋大學(xué);中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所
• 主分類號: A61K38/01
• 分類號: A61K38/01;A61P39/06;A23L1/305;C12P21/06
• 代理公司: 大連非凡專利事務(wù)所 21220
• 代理人: 高學(xué)剛

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種蛋白酶酶解液，以及該種酶解液作為抗氧化劑的應(yīng)用。

背景技術(shù)

海馬在全世界共有20多種，多數(shù)生活在近海，水藻和海草茂盛、風(fēng)浪不使很大大的海域。我國海馬資源豐富，東南沿海均產(chǎn)海馬，以南海較多。另外，海馬作為一種著名中藥，在很多地方藥房均有銷售，為海馬的研究提供了可能。

海馬有很多對人類有益的功能，如溫腎壯陽、緩解前列腺增生、耐缺氧、抗氧化、抗疲勞、延緩衰老、抗腫瘤等，所以是珍貴的海洋生物資源，具有很重要的研究和開發(fā)價值。根據(jù)已有報道，目前科研人員對海馬組分的研究主要集中在氨基酸、微量元素、甾體類和磷脂等化學(xué)成分，但對海馬蛋白質(zhì)及酶解液的研究報道非常少。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，過量的自由基會在有機(jī)體中引起一系列生物學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致組織細(xì)胞、亞細(xì)胞核分子結(jié)構(gòu)的破壞，并隨著破壞層次逐漸擴(kuò)展造成功能損傷，引起心血管疾病、癌癥和衰老等，它是構(gòu)成很多疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)。因此抗氧化劑的研究對有效預(yù)防和治療某些疾病十分重要。而人工合成的抗氧化劑往往具有一定的毒副作用，使得它們早使用時受到嚴(yán)格的控制。而天然抗氧化劑副作用小，安全性高，有利于產(chǎn)品的進(jìn)一步應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述不足，提出一種成本低廉、獲得容易的海馬胰蛋白酶酶解液，以及該種海馬胰蛋白酶酶解液作為抗氧化劑的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：一種海馬胰蛋白酶酶解液，其特征在于：所述的海馬胰蛋白酶酶解液按照以下步驟制備獲得：

將質(zhì)量比為100:5的海馬粉末和胰蛋白酶置于燒杯中，并向燒杯中加入pH=8.0的PBS緩沖溶液獲得混合溶液，且海馬粉末與PBS緩沖溶液的質(zhì)量體積比為1:200，將混合溶液在50-60℃的條件下恒溫水浴酶解6-8h，然后將混合溶液在100℃的條件下水浴至少10min，之后對混合溶液進(jìn)行離心處理并取上清液，將上清液經(jīng)0.45μm的濾膜過濾，濾后的液體即為海馬胰蛋白酶酶解液。

所述的海馬粉末為雄海馬粉末。

一種如上所述的海馬胰蛋白酶酶解液，其特征在于：所述的海馬胰蛋白酶酶解液作為抗氧化劑的應(yīng)用。

所述的海馬胰蛋白酶酶解液對DPPH自由基進(jìn)行清除的應(yīng)用。

所述的海馬胰蛋白酶酶解液對羥基自由基進(jìn)行清除的應(yīng)用。

所述的海馬胰蛋白酶酶解液對超氧陰離子自由基進(jìn)行清除的應(yīng)用。

本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)：

本發(fā)明公開一種海馬胰蛋白酶酶解液，同時經(jīng)過試驗(yàn)表明，該種海馬胰蛋白酶酶解液具有較好的抗氧化活性，對DPPH自由基（DPPH·）、羥基自由基（·?OH）和超氧陰離子自由基（O₂^—·）都有較好的清除效果，因此這種海馬胰蛋白酶酶解液可以作為抗氧化活性的藥物和保健品的原料進(jìn)行生產(chǎn)，同時該種海馬胰蛋白酶酶解液獲得容易，成本低廉，因此可以說它具有多種優(yōu)點(diǎn)，特別適合于在本領(lǐng)域中推廣應(yīng)用，其市場前景十分廣闊。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合說明本發(fā)明的具體實(shí)施方式。一種海馬胰蛋白酶酶解液，按照以下步驟制備獲得：

將質(zhì)量比為100:5的海馬粉末和胰蛋白酶置于燒杯中，并向燒杯中加入pH=8.0的PBS緩沖溶液，獲得混合溶液，且海馬粉末與PBS緩沖溶液的質(zhì)量體積比為1:200，將混合溶液在50-60℃的條件下恒溫水浴酶解6-8h，然后將混合溶液在100℃的條件下水浴至少10min，滅酶活，之后對混合溶液進(jìn)行離心處理并取上清液，將上清液經(jīng)0.45μm的濾膜過濾，經(jīng)過濾膜過濾后的液體即為海馬胰蛋白酶酶解液；這里的海馬粉末優(yōu)選雄性海馬制成的粉末。

通過上述方法所獲得的海馬胰蛋白酶酶解液，可以作為抗氧化劑應(yīng)用。

對經(jīng)過上述方法獲得的海馬蛋白酶酶解液進(jìn)行抗氧化活性研究實(shí)驗(yàn)，具體步驟如下：