[發明專利]一株不動桿菌及其制備方法、應用

有效

• 申請號: 201510067447.5
• 申請日: 2015-02-10
• 公開（公告）號: CN104630112B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發明（設計）人: 張翼;任燁;王海云
• 申請（專利權）人: 紹興柯橋江濱水處理有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/34
• 代理公司: 紹興市越興專利事務所(普通合伙)33220
• 代理人: 蔣衛東

技術領域

本發明涉及一株不動桿菌及其制備方法、應用，尤其是在降解廢水中的對苯二甲酸的應用，屬于微生物應用技術領域。

背景技術

堿減量廢水產生于滌綸織物的堿減量加工工藝，堿減量廢水的主要成分為對二甲酸(PTA)、乙二醇(EG)、聚酯低聚物及少量的助劑(如季銨鹽陽離子面活性劑、耐堿滲透劑和N，N-聚氧乙烯基烷基胺)等，其中，PTA占COD總荷的63％～71％，是堿減量廢水的特征性污染物[1]。在堿減量廢水中，PTA以“三廢”形式進入環境，某些廢水(如PTA生產廢水與聚酯生產廢水)中，PTA的濃度高達數千毫克每升[2]。PTA對魚類有刺激毒害性[3]，對水中微生物的再生有抑制的作用，對某些動物有致畸和致突變作用[4-5]。有效地處理堿減量廢水中的PTA，一直是人們關注的問題。

目前處理PTA 廢水的主要方法為：活性炭吸附、臭氧或二氧化氯氧化的物化處理法及用好氧、厭氧或厭氧-好氧的生化處理法等. 近年來PTA 的生物降解處理技術受到更廣泛的關注，國內外學者對如何利用微生物處理PTA 生產廢水進行了大量的研究[6-10]。眾多研究表明 PTA 可以被多種微生物分解 而且可以作為微生物惟一的碳源而被降解. 降解PTA 的微生物廣泛存在于土壤、河流、污水處理廠的活性污泥與堆肥中. 單一菌株、混合菌和活性污泥都可以在有氧與厭氧條件下降解PTA，好氧降解速度比厭氧降解速度要快得多。目前已有的文獻報道中，有人篩選到能降解PTA的菌包括革蘭氏陰性和陽性桿菌、八疊球菌、絲菌和酵母菌。陳鵬等人發現一種假絲酵母，能夠在72小時內對1400mg/L的PTA降解80%以上，降解效率較好，但是降解速率較慢。

因此，為解決上述技術問題，確有必要提供一種新的一株不動桿菌及其降解對苯二甲酸的應用，以克服現有技術中的所述缺陷。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明的第一目的在于提供一種易于獲得、降解對苯二甲酸效果好且對印染廢水適應性好的一株不動桿菌。

本發明的第二目的在于提供一株不動桿菌的應用。

本發明的第三目的在于提供一株不動桿菌的制備方法。

為實現上述第一目的，本發明采取的技術方案為：一株不動桿菌，其此株菌分類名為不動桿菌T1（Acinetobacter sp.T1），已于2014年11月9日保藏于中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏號為CCTCC NO. M 2014558。

為實現上述第二目的，本發明采取的技術方案為：一株不動桿菌的應用，其用于高效率降解印染廢水中的對苯二甲酸。

本發明的一株不動桿菌的應用進一步為：其接種量為1%，溫度為20-40℃，pH為6-8，印染廢水（對苯二甲酸濃度為100-1000mg/L），搖床轉速為150-200r/min，24h后檢測其降解效率。

為實現上述第三目的，本發明采取的技術方案為：一株不動桿菌的制備方法，其包括如下工藝步驟：

1），富集：取曝氣池水，并加入富集培養基中，在180r/min的速度下攪拌，30℃培養1天，1天后取富集液，并加入富集培養基中，如此重復2次；

2），篩選：取富集液進行稀釋涂平板，并在篩選培養基上以30℃培養1-2天，直至平板上長出菌落；

3），分離純化和分子鑒定：將平板上長出的菌落在牛肉膏蛋白胨平板上進行劃線純化，30℃培養24 - 48h，挑長出的單菌落重復劃線3次；單菌落培養成菌液制成甘油管保存；

4），復篩：配制降解培養基，接種純化的菌株，接種量為1%，培養24小時候檢測降解培養基中對苯二甲酸的濃度，挑選出對苯二甲酸濃度下降較多菌株，制成甘油管保存。

本發明的一株不動桿菌的制備方法進一步為：步驟1）中，富集培養基中包含如下成分（單位為g/L）：酵母浸出粉5.0，蛋白胨10.0，NaCl10.0，用1mol/L NaOH調pH至7.0。

本發明的一株不動桿菌的制備方法進一步為：步驟1）中，水和富集培養基的量為1:100；富集液和富集培養基的量為1:100。

本發明的一株不動桿菌的制備方法進一步為：步驟2）中，篩選培養基中包含如下成分（單位為g/L）： NH₄Cl1.0，KH₂PO₄3.0,Na₂HPO₄7.0，NaCl0.5，MgSO₄·7H₂O0.25，PTA（對苯二甲酸）1.0，瓊脂15，用1mol/L NaOH調pH至7.5。