[發(fā)明專利]用于制備細(xì)菌素durancinGL的重組菌、制備方法及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510067196.0 | 申請日： | 2015-02-10 |
| 公開（公告）號： | CN104593313B | 公開（公告）日： | 2018-03-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 鞠興榮;陳信全;都立輝;袁建;何榮;和肖營;吳學(xué)友;劉凌平;施榮華 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京財經(jīng)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/31;C12P21/02 |
| 代理公司： | 南京匯盛專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙)32238 | 代理人： | 袁靜 |
| 地址： | 210023 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 制備 細(xì)菌 durancin gl 重組 方法 應(yīng)用 | ||
1.用于制備細(xì)菌素durancin GL的重組菌，其特征在于所述重組菌攜帶由細(xì)菌素durancin GL、純化標(biāo)簽和酶切位點(diǎn)相連形成的融合蛋白的編碼基因，所述純化標(biāo)簽是GST標(biāo)簽通過酰胺鍵與His標(biāo)簽相連而成，所述酶切位點(diǎn)是腸激酶酶切位點(diǎn)，所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；
將由細(xì)菌素durancin GL、純化標(biāo)簽和酶切位點(diǎn)相連形成的融合蛋白的編碼基因插入表達(dá)載體得到重組載體；將所述重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌，得到所述重組菌；
所述重組載體是將由細(xì)菌素durancin GL、酶切位點(diǎn)相連形成的融合蛋白的編碼基因插入表達(dá)載體pGEX-6P-1后獲得。
2.制備細(xì)菌素durancin GL的方法，其特征在于誘導(dǎo)權(quán)利要求1所述重組菌表達(dá)由細(xì)菌素durancin GL、純化標(biāo)簽和酶切位點(diǎn)相連形成的融合蛋白，破碎所述重組菌得到裂解液，離心取上清液，采用HisTrap HP柱和GSTrap 4B柱分離或者采用GSTrap 4B柱分離，收集洗脫峰，采用腸激酶酶解所述由細(xì)菌素durancin GL、純化標(biāo)簽和酶切位點(diǎn)相連形成的融合蛋白，除去酶解液中的純化標(biāo)簽，得到細(xì)菌素durancin GL。
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