[發明專利]一種豬克隆胚胎的高效制備方法在審
| 申請號： | 201510067003.1 | 申請日： | 2015-02-06 |
| 公開（公告）號： | CN104651407A | 公開（公告）日： | 2015-05-27 |
| 發明（設計）人： | 吳珍芳;石俊松;羅綠花;周榮;紀紅美;蔡更元;賀曉燕 | 申請（專利權）人： | 廣東溫氏食品集團股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/877 | 分類號： | C12N15/877 |
| 代理公司： | 廣州番禺容大專利代理事務所(普通合伙) 44326 | 代理人： | 劉新年 |
| 地址： | 527400 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 種豬 克隆 胚胎 高效 制備 方法 | ||
1.一種豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)、在成熟的去核豬卵母細胞中注入供體細胞，在無鈣融合液中，電刺激使供體細胞融合到去核卵母細胞內，培養1-1.5h；
(2)、挑出已融合的胚胎，放入鈣離子濃度為0.1mmol/L的激活液內，電刺激激活胚胎，即得豬克隆胚胎。
2.根據權利要求1所述的豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，步驟(1)中融合后于38.5℃、5％二氧化碳、飽和濕度的培養箱內培養1.5h。
3.根據權利要求1或2所述的豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，所述供體細胞分離自公豬耳組織成纖維細胞。
4.根據權利要求1或2所述的豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，步驟(1)所述電刺激為2個60μs，1.7kv/cm的直流電脈沖。
5.根據權利要求1或2所述的豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，步驟(2)所述電刺激為2個80μs，1.6kv/cm的直流電脈沖。
6.根據權利要求1或2所述的豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，步驟(1)中所述無鈣融合液的配方為Manicol?0.25mol/L，MgCl2·6H2O0.1mmol/L，HEPES?0.5mmol/L，PVA?0.1g/L。
7.根據權利要求1或2所述的豬克隆胚胎的高效制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述激活液的配方為Manicol?0.25mol/L，CaCl2·2H2O?0.1mmol/L，MgCl2·6H2O?0.1mmol/L，HEPES?0.5mmol/L，PVA?0.1g/L。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于廣東溫氏食品集團股份有限公司;，未經廣東溫氏食品集團股份有限公司;許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201510067003.1/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
