[發明專利]一株可同時降解多種鄰苯二甲酸酯的壤霉菌(Agromycessp．)MT?E

有效

• 申請號: 201510066111.7
• 申請日: 2015-02-09
• 公開（公告）號: CN104805018B
• 公開（公告）日: 2017-09-01
• 發明（設計）人: 莫測輝;趙海明;李彥文;蔡全英;李慧;杜歡;林靜;馮乃憲
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;B09C1/10;C12R1/645
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 任重

技術領域

本發明涉及環境污染物生物處理技術領域，具體地，涉及一株新型鄰苯二甲酸酯降解菌，更具體地，涉及一株可同時降解多種鄰苯二甲酸酯的壤霉菌(Agromyces sp.)MT-E。

背景技術

鄰苯二甲酸酯，又稱酞酸酯，縮寫PAEs，是鄰苯二甲酸形成的酯的統稱。其中，鄰苯二甲酸二丁酯（di-n-butylphthalate，DBP）和鄰苯二甲酸二異辛酯（di-(2-ethylhexyl) phthalate，DEHP）是兩種最廣泛使用的塑料增塑劑，在PVC塑料中其含量可達40~60%。近幾十年來，我國塑料大棚和農膜使用量急劇增加。隨著塑料薄膜的大量使用，越來越多的DBP和DEHP被釋放進入農田土壤，它們已成為在農田土壤中最常被檢出的有機污染物，檢測級別達到mg/kg。研究表明，這兩種鄰苯二甲酸酯具有高毒性，致畸性、致癌性和致突變性，以及生殖毒性，已被美國環境保護局（EPA）列為優先控制污染物。因此，我國農業土壤中的DBP和DEHP污染問題亟待解決。

由于這兩種鄰苯二甲酸酯的化學穩定性很好，自然條件下通過光解、水解等化學作用消失的速率非常緩慢，其半衰期長達20 年之久，絕大部分的DBP和DEHP主要是通過生物降解途徑從環境中消失。其中微生物降解具有成本低，條件溫和，不產生二次污染等優點，符合構建環境友好型及資源節約型社會的要求與發展趨勢。因此，利用微生物的降解作用將DBP和DEHP轉化為無害物質是去除環境中鄰苯二甲酸酯污染的最佳手段。

目前，國內外學者已分別針對DBP和DEHP篩選出許多具有良好降解性能的菌株，但其中能夠同時降解這兩種鄰苯二甲酸酯的菌株很少。壤霉菌（Agromycessp.）是土壤中廣泛存在的一類菌屬，目前有報道該菌屬的某些菌種具有可高效降解苯酚、農藥噻蟲嗪及耐重金屬的特性，但尚未見其可降解鄰苯二甲酸酯的報道。

發明內容

本發明為了克服現有技術的上述不足，提供一株新型鄰苯二甲酸酯降解菌。

為了實現上述目的，本發明是通過以下方案予以實現的：

一株壤霉菌(Agromycessp.)菌株MT-E，所述菌株于2015年1月22日保藏在中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏編號為CCTCC NO: M 2015054，保藏地址為：中國武漢武漢大學，菌株分類命名為Agromycessp. MT-E。

本發明所述壤霉菌(Agromycessp.)菌株MT-E是從常年使用塑料大棚的農田土壤中分離篩選獲得的，該菌株可同時高效降解DBP和DEHP，因此本發明補充了鄰苯二甲酸酯降解菌的種質資源，也為進一步研發PAEs污染的農田土壤的生物修復技術提供了科學依據，具有廣泛的應用潛力。

壤霉菌(Agromycessp.)菌株MT-E在牛肉膏蛋白胨培養基（LB）上劃線培養7天，菌落呈暗黃色、扁平、濕潤、邊緣不平整、擴散生長，七天后幾乎鋪滿平板。掃面電子顯微鏡下呈短桿狀，長約0.8~1.5微米，寬約0.3~0.5微米。經生理生化檢測，該菌為革蘭氏陽性菌。另外，該菌株的最適生長條件為：溫度30~35℃，pH為6.0~8.0。

壤霉菌(Agromycessp.)菌株MT-E的16S rDNA基因序列如SEQ ID NO:1所示，通過NCBI官方網站（http://www.ncbi.nlm.nih.gov/）的BLAST程序與其他已登錄細菌菌株16S rDNA序列進行比對，結果表明該菌株與Agromycessp. 相似性最高，同源率達99%。

壤霉菌(Agromycessp.)菌株MT-E具有同時高效降解DBP和DEHP的能力。將制備好的MT-E菌種懸液接種于均含有200 mg/L的DBP和DEHP的MSM培養基三角瓶中，該菌以DBP和DEHP作為唯一碳源生長，并對其具有高效的降解率。在第1，3，5，7天對DBP的降解率分別為8.40%，40.64%，89.30%，97.06%；對DEHP的降解率分別為5.31%，30.92%，73.12%，86.25%。可見，該菌株對兩種鄰苯二甲酸酯均具有良好的降解效果。