[發明專利]G-CSF 綴合物的液體制劑

有效

• 申請號: 201510065114.9
• 申請日: 2008-08-27
• 公開（公告）號: CN104689333B
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: W·因德雷爾;C·謝克曼
• 申請（專利權）人: 拉蒂奧法姆有限責任公司
• 主分類號: A61K47/59
• 分類號: A61K47/59;A61K38/18;A61J1/06;A61P25/00;A61P7/00
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 史文靜;黃革生

本發明涉及包含與聚合物綴合的粒細胞集落刺激因子多肽的液體藥物組合物，組合物的pH值在4.5至5.5的范圍內。該組合物還包含表面活性劑，以及任選的一種或多種其他可藥用的賦形劑。此外，本發明組合物不含作為緩沖劑的酒石酸或其鹽和琥珀酸及其鹽，并且不含作為穩定劑的氨基酸。該組合物具有良好的儲存穩定性，并且特別用于預防和治療使用粒細胞集落刺激因子制劑治療有用的疾病和醫學適應癥。

本申請為2008年8月27日提交的、發明名稱為“G-CSF綴合物的液體制劑”的PCT申請PCT/EP2008/061232的分案申請，所述PCT申請進入中國國家階段的日期為2010年3月1日，申請號為200880104971.3。

本發明涉及一種包含與聚合物綴合的粒細胞集落刺激因子多肽的液體藥物組合物，組合物的pH值在4.5至5.5的范圍內。該組合物還包含表面活性劑，以及任選地包含一種或多種其他可藥用的輔料。此外，本發明組合物不含作為緩沖劑的酒石酸或其鹽、和琥珀酸及其鹽，并且不含作為穩定劑的氨基酸。該組合物具有良好的儲存穩定性，并且特別用于預防和治療認為使用粒細胞集落刺激因子制劑治療有用的疾病和醫學適應癥。

粒細胞集落刺激因子(G-CSF)是一種造血生長因子，刺激造血前體細胞的增殖和分化，以及嗜中性粒細胞的活化。G-CSF能夠在體內或體外支持嗜中性粒細胞的增殖。來自日本和美國的小組于1986年克隆了人形式的G-CSF(見如Nagata等人,Nature 319:415-418,1986)。這種天然人類糖蛋白以兩種形式存在，一種具有174個氨基酸，另一種具有177個氨基酸。豐度更高和活性更高的174個氨基酸形式已用于通過重組DNA技術開發藥物產品。

重組G-CSF已在基因工程大腸桿菌(Escherichia coli)中大量生產，并已成功地用于臨床應用，以治療由于化學療法導致中性粒細胞減少的癌癥患者。大腸桿菌生產的G-CSF是一種在其N端包含額外甲硫氨酸的175個氨基酸的多肽鏈。該蛋白質通過在E.coli中表達G-CSF基因，并純化蛋白質產品至同質性來生產。該蛋白質為疏水性蛋白質，具有5個半胱氨酸殘基，其中有4個形成二硫鍵。游離的半胱氨酸殘基通常與在溶液中存儲時形成更高分子量的聚集物有關。蛋白質聚集物也可通過蛋白質氧化形式形成，其中蛋白質氧化形式通過蛋白質一級序列內部甲硫氨酸殘基的氧化產生。在四個甲硫氨酸殘基中，一個位于N端，另外三個在序列內部。包含122位氧化態甲硫氨酸的蛋白質氧化形式，能夠通過常規反相HPLC分離程序從包含127位或138位氧化態甲硫氨酸的形式以及天然蛋白質中分離出來(用由175個氨基酸組成的甲硫氨酰-G-CSF計算位置)。

在大腸桿菌表達系統中合成的重組人G-CSF稱為非格司亭(國際非專有名稱，INN)。非格司亭的結構與天然糖蛋白略有不同。重組人G-CSF的另一種形式稱為來格司亭(INN)，是在中國倉鼠卵巢(CHO)細胞中合成的。非格司亭和來格司亭在歐洲市場的商品名分別為和Granocyt。

然而，市售重組人G-CSF形式具有短期藥理學作用，必須在白細胞減少狀態期間多于每天一次地經常施用。具有更長循環半衰期的分子可減少減輕白細胞減少和預防后續感染必要的給藥次數。目前可用的重組人G-CSF產品的另一問題是劑量依賴性骨痛的發生。由于骨痛作為重組人G-CSF治療的明顯副作用為病人所體驗，因此希望提供一種不引起骨痛的重組人G-CSF產品，或借助于本身不具這種作用的產品，或借助于在不引起骨痛或至少減少骨痛的足夠小的劑量下有效的產品。因此，明顯存在對改進型重組G-CSF分子的需要，以及對包含G-CSF分子的穩定的隨時可用藥物制劑的需要。