[發明專利]一種檀香三倍體植株的誘導方法

有效

• 申請號: 201510058720.8
• 申請日: 2015-02-04
• 公開（公告）號: CN104585038A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 張新華;胡秀;熊友華;劉念;馬國華
• 申請（專利權）人: 中國科學院華南植物園;仲愷農業工程學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01H1/08
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

技術領域：

本發明屬于植物繁殖領域，具體涉及一種檀香三倍體植株的誘導方法。

背景技術：

檀香(Santalum?album?L.)為檀香科(Santalaceae)檀香屬(Santalum)半寄生常綠喬木，為名貴、珍稀植物，主要分布于印度，印度尼西亞，澳大利亞及太平洋的一些群島。人類利用它已有數千年的歷史，因其木材可用于雕刻和提煉檀香油而格外出名，素有“綠色黃金”之稱。檀香木是提取檀香油的原材料，它含有α和β檀香醇等成分，其主要用于化妝品、香料、藥材和高級工藝雕刻品等的原料；它含有的抗菌和抗腫瘤成分，作為傳統中藥，可用于安神、潔凈空氣以及治療一些頑固疾病。

多年來，人們一直希望能夠以人工栽培方式發展檀香木產業，實現較高的經濟回報。國內外研究人員已經對檀香的組培快繁進行大量的研究。研究資料表明：在斐濟，檀香和斐濟檀香的有性雜交種F₁代表現出明顯的雜種優勢，其生長勢比母本斐濟檀香高300％，比父本檀香則高32％；結香方面，檀香需要10年，而雜種檀香則需要6-7年；在心材生長方面，一般每株檀香需要種植25-30年心材達到40-80公斤，而雜種檀香F1只需種植15-20年。由此可見，培育檀香新品系是提高其經濟價值的有效途徑之一。目前，我國在檀香屬種源篩選、雜交育種、優良品系的創新等方面仍較空白，如不及時進行種質資源和技術創新，勢必制約我國檀香產業的發展，無法擺脫完全依賴進口的被動局面。因此，在我國發展檀香產業和尋找其它經濟有效的方法以提高檀香的經濟效益勢在必行。

多倍體(polyploid)系指生物體體細胞中含有超過2個染色體組的個體。一般地，多倍體植物較二倍體植物的營養器官粗大、營養物質更加豐富、抗逆性強等優良性狀。目前，可通過胚乳脫分化培養、二倍體與四倍體雜交兩種途徑獲得三倍體植株。國內，已有柑橘、蘋果、枸杞、獼猴桃、玉米、大麥等誘導三倍體植株的報道，但尚無檀香三倍體植株誘導的相關報道。

發明內容：

本發明的目的是提供一種簡單、易操作，能獲得檀香三倍體植株的誘導方法。

本發明的檀香三倍體植株的誘導方法，其特征在于，包括以下步驟：

將檀香(Santalum?album?L.)成熟種子消毒后，在無菌條件下用250～500mg/L的赤霉素水溶液浸泡消毒后的檀香種子20～24h，然后取出種子用無菌蒸餾水沖洗，接著剝掉外種皮，余下種子接種至誘導培養基上，置于光照強度40～50μmol?m^-2s^-1，光照時間12～16h/d，培養溫度(26±2℃)進行培養，誘導出不定芽，不定芽接種至相同的誘導培養基上，置于光照強度40～50μmol?m^-2s^-1，光照時間12～16h/d，培養溫度(26±2℃)進行繼代培養，誘導不定芽分化與生長，然后進行多倍體篩選與鑒定獲得檀香三倍體植株；

所述的誘導培養基每升含有6-BA?0.2～0.5mg、蔗糖20～30g和常量的瓊脂，余量為MS培養基，pH?5.5-5.8。

所述的消毒優選為將檀香種子在無菌條件下先用體積分數75％酒精水溶液浸泡消毒1min，再用質量分數0.1％HgC1溶液浸泡消毒12min，無菌蒸餾水沖洗3-5遍。

所述的取出種子用無菌蒸餾水沖洗，優選沖洗3～5次。

所述的常量的瓊脂是使誘導培養基變成固體的量，其量屬于本領域常規知識，如每升誘導培養基含有7.5g的瓊脂。

所述的多倍體篩選與鑒定是誘導出的不定芽進行分化和生長出無根幼苗，無根幼苗長高至3～4cm左右時，以檀香體外莖段培養的二倍體苗作為對照，通過形態學觀察比較初步篩選出與檀香體外莖段培養的二倍體苗不同的植株，經莖尖染色體壓片計數的方法，再次鑒定具細長葉片的苗為三倍體植株。

所述的MS培養基為國際通用的培養基，其成份和配置方法可參考書籍(譚文澄、戴策剛主編.觀賞植物組織培養技術.北京：中國林業出版社，1991.)。

本發明經過經高濃度赤霉素預處理的檀香種子接種到含低濃度細胞分裂素的誘導培養基中，就可以使其直接誘導不定芽，經2次繼代培養并獲得檀香三倍體植株，節省了大量的人力和物力，為檀香六倍體的育種提供技術支持。可望獲得更高產量的心材，取得更高的經濟收益，并為其它檀香種源的育種提供借鑒。

因此，本發明通過誘導檀香種子成三倍體植株，為進行檀香多倍體加倍研究，獲得優良的檀香新品種，發展檀香產業提供有效技術途徑之一。本發明具有操作簡單易行，應用價值高等優點。

附圖說明：