[發(fā)明專利]一種生物防治抗紅景天根腐病及促生的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510058561.1
• 申請(qǐng)日: 2015-02-04
• 公開（公告）號(hào): CN104604503B
• 公開（公告）日: 2017-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳淵;胡慧雯;徐薇薇;阮暉;梁瑩;許麗珍;吳孔華;莫建平;史金昕波;繆丹;俞雨;吳盛彬;徐騰洋
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): A01G1/00
• 分類號(hào): A01G1/00;A01G13/00;A01N63/00;A01P3/00;A01P21/00
• 代理公司: 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司33224
• 代理人: 陳升華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物防治肥的制備領(lǐng)域，具體涉及一種生物防治抗紅景天根腐病及促生的方法。

背景技術(shù)

紅景天(學(xué)名：Rhodiola?rosea?L.)為多年生草本植物，高10-20厘米。根粗壯，圓錐形，肉質(zhì)，褐黃色，根頸部具多數(shù)須根，根莖短，粗狀，圓柱形，被多數(shù)覆瓦狀排列的鱗片狀的葉，生長(zhǎng)在海拔1800-2500米高寒無污染地帶，其生長(zhǎng)環(huán)境惡劣，因而具有很強(qiáng)的生命力和特殊的適應(yīng)性。紅景天可作藥用，能夠補(bǔ)氣清肺，益智養(yǎng)心，是一味作用廣泛的中藥，亦有美容效果，可作護(hù)膚品，也可食用。紅景天根腐病是紅景天病害中危害較為嚴(yán)重的一種，病原菌是Fusarium?oxysporum。

植物病理真菌主要存在于土壤中，在植物生長(zhǎng)中感染植物，引起植物病害、造成生產(chǎn)損失。因此，要從生物防治的角度消除植物真菌病害，除了殺滅植株上的病理真菌，殺滅或抑制土壤中的病理真菌也至關(guān)重要，而使用具有生物防治功效的生物肥是實(shí)現(xiàn)這一目的的有效途徑。在各種生物肥中，長(zhǎng)久以來我國(guó)應(yīng)用的都是無芽孢菌類。但是無芽孢菌抗逆性低，對(duì)于干燥高溫的抵抗能力差，所以當(dāng)制成液體或者吸附劑時(shí)穩(wěn)定性不高。生物肥發(fā)展的新趨勢(shì)應(yīng)是大力發(fā)展抗逆性高、能夠長(zhǎng)期穩(wěn)定生存的芽孢桿菌。特別是芽孢桿菌能夠產(chǎn)生多種抗真菌物質(zhì)，對(duì)植物病原菌有顯著抑制作用，并且對(duì)人畜無害，也不會(huì)污染環(huán)境，將在防治植物真菌病害中起重要作用。

芽孢桿菌形態(tài)上呈直或者近直的桿狀，好氧或者兼性厭氧，革蘭氏陽性，在特定環(huán)境條件下能產(chǎn)生抗逆性內(nèi)生孢子。芽孢桿菌在植物中廣泛定殖，被認(rèn)為是公認(rèn)的食品級(jí)安全微生物(generally?regarded?as?safety,GRAS)。枯草芽抱桿菌是一種典型的芽孢桿菌，產(chǎn)生抗菌蛋白、多肽類物質(zhì)、脂類物質(zhì)及beta葡聚糖酶等抗菌物質(zhì)，特別是beta葡聚糖酶等水解酶類與其抗植物病理真菌能力有密切關(guān)系，因?yàn)檎婢?xì)胞壁的組成是葡聚糖。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了一種生物防治抗紅景天根腐病及促生的方法，通過將產(chǎn)beta葡聚糖酶的枯草芽孢桿菌(CICC?10339)融入紅景天天然菌群中，制成能夠通過生物防治途徑有效抑制殺滅紅景天病理真菌的生物肥。

一種生物防治抗紅景天根腐病及促生的方法，包括以下步驟：

1)將枯草芽孢桿菌(CICC?10339)進(jìn)行培養(yǎng)，制成密度10⁹～10¹⁰cfu/mL的高密度菌懸液；

2)將紅景天健康枝條剪成小段進(jìn)行堆肥，堆肥過程中噴施步驟1)中的高密度菌懸液，堆肥結(jié)束后進(jìn)行發(fā)酵，經(jīng)發(fā)酵后得到能有效抑制殺滅紅景天病理真菌的生物肥，將該生物肥用在生物防治抗紅景天根腐病及促生上。

本發(fā)明中，將紅景天健康枝條剪成小節(jié)堆肥，使所制備生物肥中的菌群即為健康紅景天植株本身天然菌群，此菌群與紅景天植株協(xié)同進(jìn)化生長(zhǎng)，形成了互益共生體系，對(duì)病害真菌有一定生物防治作用。進(jìn)一步地，將能夠產(chǎn)beta葡聚糖酶的枯草芽孢桿菌(CICC?10339)加入堆肥中，顯著加強(qiáng)對(duì)紅景天病害真菌的生物防治作用。枯草芽孢桿菌(CICC?10339)由于產(chǎn)beta葡聚糖酶，對(duì)紅景天植株纖維有良好分解作用，為堆肥發(fā)酵過程所必須，故能夠充分融入到堆肥菌群中穩(wěn)定持久地增殖。如同乳酸菌對(duì)于動(dòng)物的益生作用，抑制殺滅植物病理真菌的微生物可以稱之為植物益生菌。本發(fā)明所制備生物肥中，枯草芽孢桿菌(CICC?10339)即是紅景天益生菌，對(duì)紅景天病理真菌有顯著生物防治作用。

步驟1)中，枯草芽孢桿菌(CICC?10339)采用現(xiàn)有技術(shù)，來自中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(CICC)，地址：北京市朝陽區(qū)酒仙橋中路24號(hào)院6號(hào)樓；保藏日期為2007年，菌種保持編號(hào)為10339。枯草芽孢桿菌(CICC?10339)可以向中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心購買。

將枯草芽孢桿菌(CICC?10339)進(jìn)行培養(yǎng)，包括：枯草芽孢桿菌(CICC?10339)的出發(fā)密度為10⁶～10⁷個(gè)/mL，接種至液體培養(yǎng)基中接種量為1％～5％，33℃～39℃振蕩培養(yǎng)20～28h，至菌液密度為10⁹～10¹⁰cfu/mL的高密度菌懸液。