[發明專利]一種黃獨愈傷快速繁殖方法

有效

• 申請號: 201510056427.8
• 申請日: 2015-02-03
• 公開（公告）號: CN104542308B
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 李剛;王曉峰;繆劍華;樊蘭蘭;韋坤華
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區藥用植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙)11369
• 代理人: 靳浩

技術領域

本發明涉及植物繁殖技術領域，更具體地說，本發明涉及一種黃獨愈傷快速繁殖方法。

背景技術

黃獨(Dioscoreaceae)，薯蕷科，薯蕷屬植物。一般藥用其塊莖，主要用于各科甲狀腺疾病和多種癌癥。生產上主要利用零余子進行無性繁殖，零余子冬季休眠(繆存明)長期無性繁殖致使種性退化，產量.品質連年下降。目前利用愈傷組織成苗可解決黃獨種苗緊缺的問題。

目前無論是黃獨還是其他植物物種都有利用愈傷組織進行快速繁殖。這種傳統的愈傷組織快速繁殖作用原理是：將植物組織消毒以后，進行誘導培養得到愈傷組織或是芽體，再對愈傷組織或是芽體增殖，接著進行生根培養，最后煉苗和移栽。繁殖的不同階段對培養基有不同的要求，所以需要針對性的規定每個繁殖階段激素的用法和用量。但是，傳統的方法在整個繁殖過程都使用同一種培養基，這些培養基無法滿足愈傷組織繁殖的各個階段的特定性需要，所以無法促進愈傷組織更好更快的成長。

傳統的培養基中一般加入了6-BA、IAA、IBA以及NAA，這些物質加入的量不一樣會產生不同的效果，且這些物質對于不同的植物產生的效果也不一樣。牛肉浸膏屬于動物組織培養基的添加物，其為動物組織培養提供養分。把牛肉浸膏應用于植物組織培養基會不會產生良好的效果，目前相關實驗還是比較少，特別是將牛肉浸膏應用于黃獨愈傷組織培養，目前還是空白。

為了解決這種缺陷，現有技術中公開了一種木鱉子組織培養的快速繁殖方法，其通過在愈傷組織誘導、愈傷組織分化和生根誘導階段使用不同的培養基和培養條件，以促進愈傷組織的生根率。

但是通過這種方法，是針對木鱉子的繁殖方法，由于植物物種之間具有差異性，這種方法并不適用于黃獨，且該技術方案沒有使用牛肉浸膏。因此發明一種新的黃獨愈傷成苗快速繁殖方法成為一個亟需解決的問題。

發明內容

作為各種廣泛且細致的研究和實驗的結果，本發明的發明人已經發現，在黃獨愈傷組織成苗繁殖的的不同階段使用加入不同含量的NAA、KT、6-BA和IAA的培養基時，這些加入的化合物有助于提高愈傷組織分化和繁殖的速度，提高生根率，本發明的發明人還發現在每個培養基中加入適量的牛肉浸膏，能夠促進愈傷組織的生長，使叢生芽生長的更好。基于這種發現，完成了本發明。

本發明的一個目的是解決至少上述問題，并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是在愈傷組織培養、愈傷組織分化獲得叢生芽快速繁殖培養、叢生芽壯苗培養和植株生根培養階段分別使用愈傷誘導培養基、MS繁殖培養基、MS壯苗培養基和MS生根培養基，提高愈傷組織分化速度，提高叢生芽的生長速度，提高生根率。

本發明還有一個目的是在每個培養基中加入適量牛肉浸膏，促進愈傷組織的生長，使叢生芽生長得更好。

本發明還有一個目的是通過生物技術對黃獨愈傷組織培養快速繁殖，提高黃獨種苗的繁殖系數和種苗質量，實現規模化生產，滿足生產上的需要。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供了一種黃獨愈傷成苗快速繁殖方法，包括：

使用愈傷誘導培養基進行黃獨愈傷組織誘導培養，得到愈傷組織；使用MS繁殖培養基對所得的愈傷組織進行愈傷組織分化培養，得到叢生芽；使用MS壯苗培養基中對所得的叢生芽進行叢生芽壯苗培養，得到健壯植株；使用MS生根培養基對所得的健壯植株進行植株生根培養最終得到完整植株，實現黃獨幼苗的煉苗和移栽；

其中，所述愈傷誘導培養基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的TDZ、0.5-1.0mg/L的NAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的瓊脂；

MS繁殖培養基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.1-0.4mg/L的KT、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.2-1.0mg/L的IBA、1-5g/L的GA3、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的瓊脂；

MS壯苗培養基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.4mg/L的KT、0.2-0.6mg/L的IAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的瓊脂；

MS生根培養基中含：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的NAA、0.5-1.0mg/L的IBA、15-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的瓊脂。