[發明專利]利用超臨界CO2提取開花期向日葵花盤中總黃酮的提取方法

有效

• 申請號: 201510055248.2
• 申請日: 2015-02-03
• 公開（公告）號: CN104689599A
• 公開（公告）日: 2015-06-10
• 發明（設計）人: 郝寶成;劉宇;梁劍平;高旭東;王學紅;陶蕾;郭文柱;尚若鋒;楊珍
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所
• 主分類號: B01D11/02
• 分類號: B01D11/02
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 夏晏平

技術領域

本發明涉及一種開花期向日葵花盤中總黃酮的方法，屬于天然產物分離領域。

背景技術

由于黃酮類化合物結構多樣，提取時選用的溶劑和提取方法也不盡相同。一般以甲醇、乙醇和丙酮等有機溶劑來提取，提取之前，可先用石油醚除去脂溶性化合物，或以醇沉淀的方法除去蛋白質、多糖類等水溶性物質。利用微波、超聲波輔助提取黃酮類化合物，可使產率顯著提高，時間大大節省。

黃酮類化合物在人體不能直接合成，只能從食物中獲得，因此從不同綠色植物中提取純度高、活性強的天然黃酮成分的研究也很重要。黃酮類化合物對人體有多種生理功能且不良反應少，有較大的開發和應用前景。

目前，尚未見采用超臨界CO₂提取開花期向日葵花盤總黃酮的報道。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有的缺陷，提供了一種提取率高、能耗低、操作簡便的開花期向日葵花盤中總黃酮的新提取方法。

本發明的目的通過以下技術方案來具體實現：

一種利用超臨界CO₂提取開花期向日葵花盤中總黃酮的提取方法，采用CO₂流體為萃取劑提取總黃酮。

作為優選方案，上述的利用超臨界CO₂提取開花期向日葵花盤中總黃酮的提取方法，包括以下步驟：

????1）將開花期向日葵花盤自然晾干后，粉碎；

????2）放入萃取釜中，以CO₂流體為萃取劑，萃取溫度為40-60℃、萃取壓力20-40MPa、萃取時間為1.5-2.5h，得到淡黃色的總黃酮的提取物。

???優選的，所述步驟1）中，粉碎后過200目篩。

????優選的，所述步驟2）中，萃取溫度為60℃。

????優選的，所述步驟2）中，萃取壓力為40MPa。

優選的，所述步驟2）中，萃取時間為2h。

本發明以開花期向日葵花盤為提取原料，利用超臨界CO₂萃取方法進行總黃酮的提取分離，其操作簡便、方法簡單、提取效率高等特點。超臨界CO₂提取是用無毒、無殘留的CO₂代替水或有機溶劑作提取溶劑，不僅可以在接近室溫的條件下萃取，而且可以實現高選擇性提取和分離從而獲得高質量的產品。并且超臨界CO₂提取不會產生三廢，對環境保護極為有利，提取材料CO₂價廉易得，可循環使用，生產成本較低。

在本發明提供的工藝參數范圍內，針對開花期向日葵花盤中總黃酮的提取效率高，提取速度快，節省試劑，耗能少，成本低，污染少，優于采用傳統提取技術提取開花期向日葵花盤中總黃酮。

在更進一步的優選條件下，也就是在，開花期向日葵花盤粉碎過200目篩，萃取溫度為60℃、萃取壓力40?MPa、反應時間為2h的參數條件下，提取效果最佳。

為了進一步說明本發明的實質，申請人進做了如下實驗。

????1、材料及方法

????1.1儀器與試劑材料

紫外可見分光光度計(普析?TU-1810)；超臨界萃取儀（Applied?Separations，美國）；開花期向日葵花盤原料由甘肅蘭州市紅古區某向日葵種植地采摘；蘆丁標準品采購自中國食品藥品檢定研究院，純度為92.8%，硝酸鋁采購自天津市科密歐化學試劑有限公司，甲醇等化學試劑均為分析純。

????1.2提取方法

????1.2.1開花期向日葵花盤原料處理

將開花期向日葵花盤自然條件下戶外晾干，粉碎后過200目篩，備用。

????1.2.2?總黃酮提取

精密稱取適量開花期向日葵花盤粉于萃取釜中，以CO₂流體為萃取劑，進行提取，從接樣口收集到淡黃色總黃酮提取物，用甲醇溶解備用。

????1.2.3樣品處理

將1-9號樣品加入少許甲醇（約2?ml）超聲溶解，轉移至10?ml容量瓶中并用甲醇定容至刻線；（7號溶解于25ml容量瓶中），分別精密吸取1-9號樣品1ml，用上述標準曲線制備方法處理樣品，測出吸光值并代入標準曲線計算。

????1.2.4?數據計算

????注：W2為稱取干燥向日葵的質量(g)；W1為由W2提取的總黃酮的質量(g)。

????2.試驗結果

????2.1提取率影響條件的優化結果