[發明專利]一種豬乙型腦炎重組腺病毒、穿梭載體、質粒及疫苗在審
| 申請號: | 201510053288.3 | 申請日: | 2015-02-02 |
| 公開(公告)號: | CN104651403A | 公開(公告)日: | 2015-05-27 |
| 發明(設計)人: | 曹三杰;文心田;劉瀚揚;伍銳;黃小波;文翼平;岳輝喜;田耕;周玉鵬;袁磊 | 申請(專利權)人: | 四川農業大學 |
| 主分類號: | C12N15/861 | 分類號: | C12N15/861;C12N15/40;A61K48/00;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司: | 四川君士達律師事務所 51216 | 代理人: | 芶忠義 |
| 地址: | 625000 四*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 種豬 腦炎 重組 病毒 穿梭 載體 質粒 疫苗 | ||
1.一種豬乙型腦炎重組腺病毒穿梭載體,其特征在于,將乙腦病毒E基因、IRES基因和IL6基因順次插入穿梭載體,得到含有目的基因的腺病毒穿梭載體。
2.如權利要求1所述的豬乙型腦炎重組腺病毒穿梭載體,其特征在于,所述穿梭載體為pAdtrack-CMV,所述腺病毒穿梭載體為pAdtrack-CMV-E-IRES-IL6。
3.一種豬乙型腦炎重組腺病毒質粒,其特征在于,將權利要求1或2所述的腺病毒穿梭載體與腺病毒骨架載體在轉化入大腸桿菌后發生同源重組,把外源基因E-IRES-IL6轉入腺病毒骨架載體上,經篩選后得到含有外源基因E-IRES-IL6的重組腺病毒質粒。
4.如權利要求3所述的豬乙型腦炎重組腺病毒質粒,其特征在于,所述腺病毒骨架載體為pAdEasy-1。
5.如權利要求4所述的豬乙型腦炎重組腺病毒質粒,其特征在于,所述大腸桿菌為BJ5183。
6.一種豬乙型腦炎重組腺病毒,其特征在于,是權利要求3~5任一項所述的重組腺病毒質粒轉染宿主細胞后得到的重組腺病毒rAd-E-IRES-IL6。
7.如權利要求6所述的豬乙型腦炎重組腺病毒,其特征在于,所述宿主細胞為HEK293細胞。
8.如權利要求7所述的豬乙型腦炎重組腺病毒,其特征在于,所述轉染采用陽離子脂質體法轉染。
9.一種豬乙型腦炎重組腺病毒疫苗,其特征在于,是將權利要求6~8中任一項所述的豬乙型腦炎重組腺病毒rAd-E-IRES-IL6接種宿主細胞中連續傳代,且在宿主細胞內重組腺病毒E蛋白和IL6蛋白的轉錄和表達穩定后得到。
10.如權利要求9所述的豬乙型腦炎重組腺病毒疫苗,其特征在于,所述宿主細胞為HEK293。
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