[發明專利]利用木材水解液制備微生物油脂的方法

在審

• 申請號: 201510052591.1
• 申請日: 2015-02-02
• 公開（公告）號: CN104630293A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發明（設計）人: 危臻;晏銘;曾光明;黃丹蓮;賴萃;黃超;許飄;李寧杰;程敏;張辰
• 申請（專利權）人: 湖南大學
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12R1/01
• 代理公司: 湖南兆弘專利事務所 43008
• 代理人: 趙洪

1.一種用木材水解液制備微生物油脂的方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將木材進行熱水處理得到木材水解液；

S2、將所述木材水解液去毒，在去毒后的木材水解液中添加鹽分，調節pH值為7～9，滅菌，制備成培養基；

S3、在所述培養基中接入產油脂菌的種子液，發酵得到發酵液；

S4、收集所述發酵液中的菌體進行油脂交換反應得到微生物油脂。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1步驟中所述熱水處理步驟具體為：將木材與水按照固液比為1∶5～8混合，在150～200℃條件下反應30～120?min。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2步驟中所述去毒步驟包括以下步驟：

S2-1、石灰法：在所述木材水解液中添加Ca（OH）₂，使pH為10～12，1?h后過濾取濾液，得到堿性木材水解液；在所述堿性木材水解液中加入H₂SO₄調節pH為5～6，1?h后過濾取濾液，得到酸性木材水解液；在所述酸性木材水解液中加入Na₂SO₃，在100℃反應10～20?min，過濾得到濾液；

S2-2、吸附法：在所述步驟S2-1制備得到的濾液中添加吸附樹脂，進行震蕩吸附8～12?h，完成去毒步驟。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述S2-2步驟中，所述吸附樹脂為Amberlite?XAD-4，所述吸附樹脂與所述濾液的質量體積比為1∶4～6；所述震蕩吸附反應的溫度為25～35℃，轉速為?100～160?rpm。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述鹽分包括0.5～1?g/L的（NH₄）₂SO₄、0.5～1.5?g/L的MgSO₄·7H₂O、0.010～0.015?g/L的CaCl₂·2H₂O、0.5～1.5?ml/L的微量元素液、0.5～1.5?ml/L的Stock?A?溶液和30～40?ml/L的磷酸鹽緩沖液。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述微量元素液包括0.3～0.6?g/L的FeSO₄·7H₂O、0.3～0.5?g/L的ZnSO₄·7H₂O、0.01～0.02?g/L的MnSO₄·H₂O、0.010～0.020?g/L的H₃BO₃、0.005～0.015?g/L的NiC1₂·6H₂O、0.20～0.25?g/L的EDTA、0.04～0.06?g/L的CoCl₂·6H₂O、0.004～0.006?g/L的CuCl₂·2H₂O；所述Stock?A溶液包括1.5～2.5?g/L的NaMoO₄·2H₂O及4.0～5.0?g/L的乙二胺四乙酸鐵鈉；所述磷酸鹽緩沖液包括110～115?g/L的K₂HPO₄、45～48?g/L的KH₂PO₄。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法?，其特征在于，所述產油脂菌為渾濁紅球菌（Rhodococcus?opacus）。

8.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其特征在于，所述木材包括針葉材和闊葉材。

9.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其特征在于，所述酯交換反應為：將菌體、有機溶劑和催化劑混合，萃取收集有機相，得到所述微生物油脂。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述有機溶劑為氯仿和甲醇混合溶液，所述催化劑為濃硫酸；所述菌體、氯仿、甲醇的質量體積比為10?mg∶2～5?mL∶1～4.5?mL。