[發明專利]一種提高鴨黃病毒體外感染效率的細胞親和劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201510052419.6
• 申請日: 2015-01-31
• 公開（公告）號: CN104611298B
• 公開（公告）日: 2017-03-22
• 發明（設計）人: 馮曉聲;王貴平;賈愛卿;王偉
• 申請（專利權）人: 廣東海大畜牧獸醫研究院有限公司;四川海林格生物制藥有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;C12R1/93
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙)44288
• 代理人: 羅偉添

技術領域

本發明涉及微生物病毒技術領域，具體涉及一種提高鴨黃病毒體外感染效率的細胞親和劑及其制備方法。

背景技術

鴨黃病毒(鴨坦布蘇病毒)是一種可以導致蛋鴨產蛋機能嚴重下降的病毒，其臨床表現為產蛋率突然下降，產蛋高峰期縮短，嚴重的在短時間內內產蛋率可降為零，采食量也會同時下降，個別有死亡現象。病理剖解可見卵巢充血、腫脹、壞死和萎縮等嚴重病變。該病自從2010年首次在國內被發現后，已經造成山東、湖南、廣東等蛋鴨養殖大省蛋鴨大面積減產。目前，許多研究機構在臨床分離到了鴨黃病毒，并在體外進行了細胞感染試驗，試圖通過體外培養來使該病毒增殖以期用于鴨黃病毒疫苗的研制。多篇文獻報道指出，臨床分離到的鴨黃病毒可對多種細胞進行體外感染，如VERO細胞、BHK細胞等，但原代病毒培養過程較為緩慢，細胞感染效率低，在相當長的代次內仍然看不到有明顯的細胞病變產生，病毒滴度不夠高，對于疫苗的研發是一個需要解決的問題。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種提高鴨黃病毒體外感染效率的細胞親和劑及其制備方法，該細胞親和劑能夠改善鴨黃病毒與細胞之間的微環境，增加鴨黃病毒與細胞之間的親和度，有效提高鴨黃病毒對細胞的感染率。

為解決上述問題，本發明所采用的技術方案如下：

一種提高鴨黃病毒體外感染效率的細胞親和劑，其由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

其中，有機酸為丙二酸、蘋果酸、山梨酸、檸檬酸中的一種或兩種以上。

作為本發明的優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

其中，有機酸為丙二酸、蘋果酸、山梨酸、檸檬酸中的一種或兩種以上。

作為本發明的進一步優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

作為本發明的進一步優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

作為本發明的進一步優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

具體地，所述無機鹽為硫酸鈉、磷酸氫二鈉、氯化鉀、氯化鈉中的一種或兩種以上。

具體地，所述的硫酸鈉占親和劑總量的0.15～0.3％；所述的磷酸二氫鈉占親和劑總量的0.1-1.6％；所述的氯化鈉占親和劑總量的0.09-0.9％；所述的氯化鉀占親和劑總量的0.01-1％。

本發明還提供了上述的細胞親和劑的制備方法，所述的親和劑是按以下步驟制備而成的：按配方量稱取丙二酸、磷酸、山梨酸、蘋果酸、無機鹽，將上述組分溶于配方量的去離子水中，過濾即得。

相比現有技術，本發明的有益效果在于：

本發明所述的細胞親和劑主要是由有機酸、磷酸、無機鹽及去離子水復配制成，通過改變培養液中的離子強度，干擾細胞壁疏水和親水基團的電荷排斥作用，使病毒能夠更容易進入細胞。該細胞親和劑能夠改變鴨黃病毒與細胞間的微環境、增加鴨黃病毒與細胞間親和度，使鴨黃病毒更加快速地感染生產用細胞，提高了鴨黃病毒對細胞的體外感染效率，從而可以更加快速地獲得高病毒滴度的鴨黃病毒，為鴨黃病毒的疫苗研發奠定基礎。

下面結合具體實施方式對本發明作進一步詳細說明。

具體實施方式

一種提高鴨黃病毒體外感染效率的細胞親和劑，其由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

其中，有機酸為丙二酸、蘋果酸、山梨酸、檸檬酸中的一種或兩種以上。

作為本發明的優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

其中，有機酸為丙二酸、蘋果酸、山梨酸、檸檬酸中的一種或兩種以上。

作為本發明的進一步優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

作為本發明的進一步優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

作為本發明的進一步優選方案，所述的細胞親和劑由以下按質量百分數計的各組分制備而成：

具體地，所述無機鹽為硫酸鈉、磷酸氫二鈉、氯化鉀、氯化鈉中的一種或兩種以上。

具體地，所述的硫酸鈉占親和劑總量的0.15～0.3％；所述的磷酸二氫鈉占親和劑總量的0.1-1.6％；所述的氯化鈉占親和劑總量的0.09-0.9％；所述的氯化鉀占親和劑總量的0.01-1％。