[發(fā)明專利]一種擬南芥的嫁接方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510049787.5
• 申請(qǐng)日: 2015-01-30
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104604539B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫超;夏陽(yáng);郝玉金;燕麗萍;劉翠蘭;李麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東省林業(yè)科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): A01G1/06
• 分類號(hào): A01G1/06
• 代理公司: 濟(jì)南圣達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司37221
• 代理人: 李健康

1.一種擬南芥的嫁接方法，步驟是：

1)砧木準(zhǔn)備：擬南芥種子無(wú)菌環(huán)境下經(jīng)過(guò)消毒處理后，播種于1/2MS固體培養(yǎng)基上，封口后置于4℃培養(yǎng)2-3天進(jìn)行春化處理，轉(zhuǎn)入長(zhǎng)日照條件下培養(yǎng)，待苗長(zhǎng)出子葉后為砧木苗，用于嫁接；

2)接穗準(zhǔn)備：將擬南芥突變體種子經(jīng)步驟1)相同的消毒處理和培養(yǎng)，待苗長(zhǎng)出子葉后為接穗苗，用于嫁接；

3)無(wú)菌環(huán)境下嫁接；

4)嫁接體培養(yǎng)：嫁接體轉(zhuǎn)入短日照培養(yǎng)，待傷口愈合，長(zhǎng)出兩片真葉；

5)嫁接苗移栽：成活的嫁接苗移栽于培養(yǎng)基質(zhì)中，澆灌營(yíng)養(yǎng)液，長(zhǎng)日照培養(yǎng)，直至嫁接苗開(kāi)花結(jié)果，收獲種子；

其特征在于：

步驟1)和2)所述對(duì)種子表面進(jìn)行消毒處理的方法是：將種子用70％乙醇處理5±2分鐘，滅菌水清洗兩次后，用2.6％NaClO消毒處理10±2分鐘，用蒸餾水清洗4-6次；

步驟1)、2)和5)所述長(zhǎng)日照條件是：光周期為16小時(shí)光照/8小時(shí)黑暗，光照條件下的溫度為22-24℃，黑暗條件下的溫度為20-22℃，光強(qiáng)為6000-8000lux，相對(duì)濕度大于70％；

步驟3)所述嫁接的方法是：在砧木苗下胚軸的上1/3處用剪刀剪斷，使地下部保留有2/3的下胚軸作為砧木；在接穗苗下胚軸的上1/3處用剪刀剪斷，使地上部保留有1/3的下胚軸作為接穗；將接穗和砧木兩個(gè)傷面的形成層貼合并貼在培養(yǎng)皿沾有水珠的培養(yǎng)皿內(nèi)壁上，封口；

步驟4)所述短日照條件是：光周期為8小時(shí)光照/16小時(shí)黑暗，光照條件下的溫度為22-24℃，黑暗條件下的溫度為20-22℃，光強(qiáng)為6000-8000lux，相對(duì)濕度大于70％；

所述步驟5)中所述的培養(yǎng)基質(zhì)為蛭石；營(yíng)養(yǎng)液為B5營(yíng)養(yǎng)基用水稀釋3倍后的溶液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述擬南芥的嫁接方法，其特征在于：步驟3)中所述的剪刀為長(zhǎng)145mm的特快型手術(shù)剪刀。