[發(fā)明專利]一種北美海棠高原之火腋芽的組培快繁方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510045664.4
• 申請日: 2015-01-29
• 公開（公告）號: CN104585036A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳穎;楊華;張往祥;羅勇亞;邱娜菲;王瑞琪
• 申請（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 賀翔

1.一種北美海棠高原之火腋芽的組培快繁方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）4月份選取高原之火海棠母株上的嫩枝條，進行去污、消毒處理，備用；

2）將嫩枝條切成帶有1個腋芽的莖段，接種在初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；培養(yǎng)室溫度為25±2℃，光照時間14h，光照強度55?μmol?m^–2?s^–1；初代培養(yǎng)5d后，腋芽開始萌動，20d后，腋芽抽長并開始產(chǎn)生叢生芽；所述初代培養(yǎng)基為：MT+1.0mg/L?BA+0.2?mg/L?IBA或1/2MS+1.5mg/L?BA+0.2?mg/L?IBA，培養(yǎng)基中含3%蔗糖、0.54%瓊脂，pH5.8；

3）從培養(yǎng)20d后的叢生芽中，剪取1.0-2.0cm的單芽轉(zhuǎn)接入增殖培養(yǎng)基中，培養(yǎng)25d后，出現(xiàn)大量的叢生芽；增殖培養(yǎng)基為：1/2MS+0.5~1.0mg/L?BA+0.5~1.0?mg/L?IBA，培養(yǎng)基中含3%蔗糖、0.54%瓊脂，pH5.8；

4）剪取長度為2-3cm的叢生芽接種到生根培養(yǎng)基中，20d后開始生根，培養(yǎng)40d后，形成健壯的再生植株；生根培養(yǎng)基為：1/4MS+1.0mg/L?IBA或1/2MS+1.0mg/L?IBA+0.15%活性炭；培養(yǎng)基中含3%蔗糖、0.54%瓊脂，pH5.8；

5）待生根的小苗長至5~6cm、根5~6條時將小苗進行馴化移栽，成活后獲得擴繁苗。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的北美海棠高原之火腋芽的組培快繁方法，其特征在于：步驟1）中的去污為：4月份選取高原之火海棠母株上長5cm的嫩枝條，用肥皂水浸泡10min，并用軟毛刷刷去表面污漬，再用流水沖洗2h后，獲得外植體備用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的北美海棠高原之火腋芽的組培快繁方法，其特征在于：步驟1）中的消毒為：在超凈工作臺上先用75%酒精對外植體浸泡30s后，用無菌水沖洗3~4次，再用0.1%升汞消毒9min，期間不斷攪拌，再用無菌水清洗4-5次，無菌濾紙吸干表面水分待用。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的北美海棠高原之火腋芽的組培快繁方法，其特征在于：步驟5）中的馴化移栽為：馴化時將瓶蓋擰松在溫室中放置1d，然后打開瓶蓋繼續(xù)放置1-2d，將小苗從瓶中取出洗去根部培養(yǎng)基，移入裝有基質(zhì)的容器中，小苗上部用帶孔透明的塑料薄膜遮蓋，7d后去除。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的北美海棠高原之火腋芽的組培快繁方法，其特征在于：移栽所用的基質(zhì)為蛭石：有機土：林下土=1:1:1，基質(zhì)要求用800倍多菌靈藥液拌合以防止病蟲害；移栽后每隔2d澆一次水，一周澆一次1/4Haogland營養(yǎng)液。