[發明專利]高活性海洋酵母干粉的制備方法

有效

• 申請號: 201510045345.3
• 申請日: 2015-01-28
• 公開（公告）號: CN105502679B
• 公開（公告）日: 2019-02-05
• 發明（設計）人: 陳文明
• 申請（專利權）人: 大連玉兔島海洋生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C02F3/34
• 代理公司: 北京凱特來知識產權代理有限公司 11260
• 代理人: 鄭立明;付久春

1.一種高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

以滿足海參養殖篩選試驗的一種海洋酵母菌為原種，采用酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培養基，將原種經斜面和搖床做成種子液，將所述種子液接入種子罐，再將所述種子罐中的所述種子液接入發酵生產罐中進行培養，將培養出的海洋酵母發酵液用離心機濃縮成海洋酵母濃縮液，將所述海洋酵母濃縮液加入保護劑后通過噴霧干燥塔噴成干粉，即得到高活性海洋酵母干粉，所述高活性海洋酵母干粉的菌數不少于80億每克，其中活性菌比例達80％以上；

作為原種的滿足海參養殖篩選試驗的一種海洋酵母為：采用從鮮活海參腸道中提取的一種海洋酵母菌，將所述酵母菌接入斜面，斜面長好后上搖床做成發酵酵母菌液，將所述發酵酵母菌液用于海參養殖篩選試驗，按每5天投10ppm所述發酵酵母菌液，不換水，其它按正常養殖模式管理，若養殖15天海參苗成活率達95％，增重率30％，則該海洋酵母菌滿足要求能作為原種；

所述酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培養基由按重量比為：酵母膏0.5、蛋白胨1、葡萄糖2和海水100混合而成。

2.根據權利要求1所述的高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，所述將原種經斜面和搖床做成種子液包括：

將保存于冷凍干燥保藏法凍干粉或液體石蠟中的海洋酵母菌原種接入斜面培養基中，在30℃溫度條件下培養48小時；將培養好的斜面菌種洗脫入裝有所述酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培養基的容器中上搖床，搖床速度為每分鐘170轉，在30℃溫度條件下培養72小時，制成種子液。

3.根據權利要求1所述的高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，將所述種子液接入種子罐為：

所述種子液按重量5％接入種子罐，30℃溫度條件下培養72小時，種子罐攪拌轉速為120轉每分鐘，充氣為每小時0.15立方米，所述種子罐中采用所述酵母膏蛋白胨葡萄糖海水海洋酵母培養基。

4.根據權利要求1所述的高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，再將所述種子罐中的種子液接入發酵生產罐中進行培養為：

將所述種子罐的種子液按重量5％接入發酵生產罐中，30℃溫度條件下培養72小時，發酵罐攪拌轉速為120轉每分鐘，充氣為每小時5立方米，發酵生產罐的罐壓為0.045MPa，發酵生產罐滅菌溫度為121℃滅菌30分鐘；發酵生產罐的培養基pH值為5.5，該培養基按重量比組成為：葡萄糖2、固體發酵大豆蛋白4、酵母膏0.5、尿素0.14、磷酸二氫鉀0.015、硫酸鎂0.01、硫酸亞鐵0.008、豆油0.1和海水100；

其中，所述固體發酵大豆蛋白的制備步驟如下：

采用下述重量配比的原料：大豆蛋白100、水60、玉米粉14、麩皮8和EM菌液5；其中，所述EM菌液的總菌數大于或等于20億/毫升，所述EM菌液內的各菌種上種子罐菌液按重量比為：枯草芽孢桿菌液2、地衣芽孢桿菌液2、巨大芽孢桿菌液2、蠟狀芽孢桿菌液2、保加利亞乳桿菌液5、乳酸桿菌液5、釀酒酵母菌液2、假絲酵母菌液2、徑陽鏈霉菌液1和黑曲霉菌液1；所述EM菌液的各菌種的菌液用種子罐接入發酵罐培育生產，種子罐與發酵罐的培養基相同，該培養基按重量比組成為：蛋白胨2、黃腐酸4.9、酵母膏4、硫酸銨2、味精0.95、氯化鉀0.85、香菇粉2、磷酸二氫鈉3.2、輕質碳酸鈣15.1、紅糖55.9、豆油1和水1000；

將原料用微波殺菌機滅菌，工具及衣物用紫外燈和臭氧機消毒，水用次氯酸鈉消毒，各原料攪拌均勻后裝入發酵飼料袋中，袋口密封，擠出空氣，溫度30℃培養20天，即得到固體發酵大豆蛋白。

5.根據權利要求4所述的高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，還包括：當發酵生產罐發酵48小時后向發酵生產罐內補充發酵生產罐培養基的補料步驟，補料量為培養基總重量一半，72小時菌數大于或等于20億/ml得到發酵生產罐培養出的海洋酵母發酵液。

6.根據權利要求1所述的高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，所述將培養出的海洋酵母發酵液用離心機濃縮為：

將培養出的海洋酵母發酵液用機械離心機離心濃縮為每毫升菌數100億的海洋酵母濃縮液。

7.根據權利要求1所述的高活性海洋酵母干粉的制備方法，其特征在于，將所述海洋酵母濃縮液加入保護劑后通過噴霧干燥塔噴成干粉為：

以脫脂奶粉、海藻糖、淀粉，甘油和輕質碳酸鈣作為保護劑；

將所述海洋酵母濃縮液與脫脂奶粉、海藻糖、淀粉、甘油，輕質碳酸鈣按重量比為4：1：1：0.5：0.5：2混合后，用噴霧干燥塔噴霧，噴霧干燥塔空氣進口溫度為130℃，出口溫度為60℃，即得到高活性海洋酵母干粉。