[發明專利]高正電荷熒光蛋白在糖胺聚糖分析檢測中的應用有效
| 申請號： | 201510044900.0 | 申請日： | 2015-01-28 |
| 公開（公告）號： | CN104678092B | 公開（公告）日： | 2017-06-06 |
| 發明（設計）人： | 李福川;王文爽;張曉茹;韓乃寒;韓文君;李瑞娟 | 申請（專利權）人： | 山東大學 |
| 主分類號： | G01N33/52 | 分類號： | G01N33/52;G01N21/64 |
| 代理公司： | 濟南金迪知識產權代理有限公司37219 | 代理人： | 朱家富 |
| 地址： | 250199 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 正電荷 熒光 蛋白 聚糖 分析 檢測 中的 應用 | ||
1.高正電荷熒光蛋白作為熒光標記物在糖胺聚糖分析檢測中的應用，具體步驟如下：
（1）使樣品與高正電荷熒光蛋白接觸，進行孵育結合，孵育時間5～30 min，孵育后待測樣品；
（2）去除孵育后待測樣品中未與糖胺聚糖結合的高正電荷熒光蛋白，或者采用熒光淬滅劑淬滅孵育后待測樣品中未與糖胺聚糖結合的高正電荷熒光蛋白，制得待檢測樣品；
（3）對待檢測樣品進行熒光測定，根據熒光強度對樣品中糖胺聚糖含量進行定性和/或定量分析；
所述高正電荷熒光蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述步驟（1）中的樣品為液體、固相載體、細胞、組織、器官。
3.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述步驟（1）中，高正電荷熒光蛋白的接觸濃度為0.01-5.0μg/ml。
4.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述步驟（2）中，熒光淬滅劑選自：石墨烯、納米金和/或有機小分子熒光淬滅劑。
5.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述步驟（3）中，定量分析是通過檢測不同稀釋度的標準樣品的熒光強度繪制標準曲線，根據標準曲線的濃度與熒光強度之間的線性關系獲得線性方程，將待測樣品的熒光強度數值代入所得線性方程，計算獲得樣品中糖胺聚糖的含量。
6.如權利要求1所述的應用，其特征在于，所述步驟（3）中熒光測定為采用熒光顯微鏡、流式細胞儀或活體成像設備進行定性分析。
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