[發明專利]一種piRNA反義核苷酸藥物組合物及其用途

有效

• 申請號: 201510044561.6
• 申請日: 2015-01-27
• 公開（公告）號: CN104645352B
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發明（設計）人: 王昆;李培峰;周露玙;趙文科;趙兵
• 申請（專利權）人: 青島大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61P9/10;A61P9/00
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙)11371
• 代理人: 吳開磊

技術領域：

本發明屬于生物醫藥技術領域，涉及一種內源性的非編碼小RNAs的新藥及用途，尤其是一種含piRNA反義核苷酸的藥物組合物及其在預防或治療心臟疾病中的用途。

背景技術：

心血管疾病是人類健康和生命的主要威脅，是人類健康的頭號殺手，全世界每年有一千七百多萬人死于心血管疾病，其死亡率已接近所有癌癥死亡率的總和。隨著人類生活水平日益提高和飲食結構的改變，心血管疾病死亡率呈明顯上升趨勢，已超過癌癥成為第一大致死原因。根據近期公布的最新統計結果表明，18歲及以上居民高血壓患病率為18.8％，估計全國患病人數1.6億多，由此造成的心肌肥大、心肌梗死、冠心病、以及心力衰竭等凋亡相關心臟疾病的病人達幾千萬。目前關于心臟疾病發病機理尚不完全清楚，心臟疾病的預防、診斷和治療尚不能達到讓人滿意的效果，急需開發新的藥物用于心臟病的診斷和防治。

細胞凋亡(apoptosis)又稱程序性細胞死亡，是指細胞在一定的生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結束生命的過程，是一個主動的、高度有序的、由基因控制及一系列酶參與的過程，對正常胚胎發育，維持細胞群體及惡性病變過程中均起重要作用，在保證多細胞生物的健康生存過程中扮演著關鍵的角色。在許多心肌損傷或心臟病理狀態下，如心肌缺血再灌注損傷、心肌肥大和心力衰竭等，心肌細胞會發生凋亡。由于成熟的心肌細胞不能分裂增殖，心肌細胞過度凋亡必然會使心肌細胞數目減少，這可能是心臟疾病發病的機理。

piRNA(piwi-interacting RNA)是近年來新發現的一類非編碼小RNA分子，總數超過4萬種，長度約26～3l nt，序列5’端具有尿嘧啶偏向性(約86％)，piRNA成簇形成基因座(loci)分布于基因組上，特異性地同Argonuat蛋白家族中的Piwi亞家族蛋白結合，并因此而得名。2006年首次在小鼠精子細胞分離得到，最初發現piRNA主要在生殖細胞系中表達，對維持生殖DNA完整、抑制轉座子轉錄、抑制翻譯、參與異染色質的形成、執行表觀遺傳調控和生殖細胞發生等均有重要作用。隨著研究的深入，人們發現piRNA可以在很多體細胞組織中廣泛或者特異性表達，包括心臟、腦、肝臟、脾臟、腎臟、肺、胃、小腸、結腸、卵巢、子宮、睪丸。

對于心臟的piRNA的研究具有非常廣泛的實踐意義與應用價值。首先，對piRNA的功能研究有利于發現新的調控心肌梗死的機制，加深人們對現有信號途徑的了解。其次，對心臟特異性piRNA的研究有利于發現新的藥物作用靶點和藥物。現在，很多研究者都利用人工合成的piRNA抑制劑對piRNA進行功能研究。這種經過諸如甲基化、膽固醇修飾的抑制劑在體內代謝時間長，特異地作用于靶標piRNA，能夠有效地抑制piRNA的表達，因而具有成為治療性藥物的可能性。這種抑制劑結構簡單，在體內不會產生免疫反應，具有很高的藥用開發價值。現在很多非編碼RNA，例如我們著重研究的piRNA在心臟中的表達調控以及功能尚且不為人們所知，我們想對這類在心臟中表達的piRNA進行表達調控以及功能的研究，從而加深人們對心肌梗死分子機制的了解，提供新的藥物作用靶點。這對于開發以piRNA為策略的心臟疾病的診斷和治療藥物具有及其重要的意義和應用前景。

發明內容：

本發明的目的在于克服現有技術存在的缺點，提供一種新型藥物組合物，確定調控心肌細胞凋亡的心臟特異性表達的piRNA及其在心肌缺血再灌、心肌梗死、冠心病、心肌肥大和心肌纖維化等心臟疾病中的用途。

為了實現上述發明目的，本發明涉及的piRNA反義核苷酸藥物組合物包括piRNA反義核苷酸和藥學上可接受的載體；所用的piRNA反義核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示：5’-CCUUGGCACAUGCGCAGAUUAUUUGUUUA-3’；所述載體為殼聚糖、膽固醇、納米顆粒和脂質體中的一種或多種，優選地為脂質體納米粒。

本發明所述藥物組合物中piRNA反義核苷酸的的含量為0.5-1克。

所述藥物組合物以口服或注射的方式給藥；其中，注射給藥方式選自靜脈注射、肌肉注射、冠狀動脈內注射或心肌注射。

本發明的piRNA反義核苷酸藥物組合物用于心肌梗死、心肌缺血損傷和心肌纖維化的治療和防治。