[發(fā)明專利]一種固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510041137.6
• 申請日: 2015-01-27
• 公開（公告）號: CN104630102B
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 韓威華;郭芳先;陳向梅;陳永科;劉鎮(zhèn)
• 申請（專利權(quán)）人: 山東蘇柯漢生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/14;C09K17/00;C12R1/065;C12R1/11;C12R1/07;C12R1/645;C09K101/00
• 代理公司: 濰坊正信專利事務(wù)所 37216
• 代理人: 王偉霞

1.一種固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑，其特征在于由以下重量份數(shù)的原料混合制備而成：

2.一種固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

分別將棕色固氮菌、巨大芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、圓褐固氮菌、根內(nèi)球囊霉和摩西球囊霉的菌種進(jìn)行高密度培養(yǎng)，首先接種至裝有體積比為15～30％的培養(yǎng)基的搖瓶中活化培養(yǎng)，將培養(yǎng)好的菌種接種到發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng)，將擴(kuò)大培養(yǎng)得到的各種單菌脫水干燥，制備成休眠體微生物干粉，然后按照棕色固氮菌18份，巨大芽孢桿菌20份，膠質(zhì)芽孢桿菌23份，圓褐固氮菌12份，根內(nèi)球囊霉10份和摩西球囊霉16份的重量比，混合得到所述固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑。

3.如權(quán)利要求2所述的固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于棕色固氮菌的休眠體微生物干粉的制備包括以下步驟：

將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的棕色固氮菌菌種接種至裝有體積比為15～30％的活化培養(yǎng)基的搖瓶中，所述活化培養(yǎng)基的配方為甘露醇10～30g/L、磷酸二氫鉀0.1～1g/L、磷酸氫二鉀0.1～2g/L、硫酸鎂0.1～1g/L、碳酸鈣2～10g/L和酵母膏0.1～1g/L，在培養(yǎng)溫度為26～30℃,搖瓶轉(zhuǎn)速120～160rpm培養(yǎng)20～30h；

將活化培養(yǎng)好的棕色固氮菌菌種接種到裝有體積比為50～70％發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi)，體積接種量為1～3％，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為葡萄糖5～30g/L、磷酸二氫鉀0.1～1g/L、磷酸氫二鉀0.1～2g/L、硫酸鎂0.1～1g/L、碳酸鈣2～10g/L和酵母膏0.1～1g/L，在培養(yǎng)溫度為28～30℃,發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速180～220rpm培養(yǎng)32～42h，至發(fā)酵罐中棕色固氮菌含量≥10⁸個/ml，然后將發(fā)酵得到的棕色固氮菌單菌經(jīng)冷凍干燥制備成休眠體微生物干粉。

4.如權(quán)利要求2所述的固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于巨大芽孢桿菌的休眠體微生物干粉的制備包括以下步驟：

將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的巨大芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為15～30％的活化培養(yǎng)基的搖瓶中，所述活化培養(yǎng)基的配方為蛋白胨8～12g/L、牛肉膏1～5g/L和氯化鈉3～7g/L，在培養(yǎng)溫度為36～40℃,搖瓶轉(zhuǎn)速180～220rpm培養(yǎng)20～32h；

將活化培養(yǎng)好的巨大芽孢桿菌菌種接種到裝有體積比為50～70％發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi)，體積接種量為1～3％，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為豆餅粉20～26g/L、玉米粉12～20g/L、磷酸氫二鉀0.05～0.15g/L、磷酸二氫鉀0.05～0.15g/L和氯化鈣2～6g/L，在培養(yǎng)溫度為36～40℃,發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速200～220rpm培養(yǎng)20～32h，至發(fā)酵罐中巨大芽孢桿菌含量≥10⁹個/ml，然后將發(fā)酵得到的巨大芽孢桿菌單菌經(jīng)沸騰干燥制備成休眠體微生物干粉。

5.如權(quán)利要求2所述的固氮、解磷、解鉀、生根復(fù)合菌制劑的制備方法，其特征在于膠質(zhì)芽孢桿菌的休眠體微生物干粉的制備包括以下步驟：

將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的膠質(zhì)芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為15～30％的活化培養(yǎng)基的搖瓶中，所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10～30g/L、磷酸氫二鉀0.1～2g/L、硫酸鎂0.1～1g/L、碳酸鈣0.5～5g/L和酵母膏0.1～1g/L，在培養(yǎng)溫度為28～32℃,搖瓶轉(zhuǎn)速140～160rpm培養(yǎng)20～30h；

將活化培養(yǎng)好的膠質(zhì)芽孢桿菌菌種接種到裝有體積比為50～70％發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi)，體積接種量為1～3％，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉5～30g/L、磷酸二氫鉀0.1～1g/L、磷酸氫二鉀0.1～2g/L、硫酸鎂0.1～1g/L、硫酸錳0.1～1g/L、碳酸鈣2～10g/L和酵母膏0.1～1g/L，在培養(yǎng)溫度為28～32℃,發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速180～220rpm培養(yǎng)40～50h，發(fā)酵罐中膠質(zhì)芽孢桿菌含量≥10⁸個/ml，然后將發(fā)酵得到的膠質(zhì)芽孢桿菌單菌經(jīng)沸騰干燥制備成休眠體微生物干粉。