[發明專利]一種PCR儀法提取毛發基因組DNA的試劑盒及其應用在審
| 申請號： | 201510036799.4 | 申請日： | 2015-01-23 |
| 公開（公告）號： | CN104531682A | 公開（公告）日： | 2015-04-22 |
| 發明（設計）人： | 李地艷;施賢;朱慶;楊明耀;徐懷亮;胡耀東;陳彬龍;張龍;吳楠;張璞 | 申請（專利權）人： | 四川農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 裴娜 |
| 地址： | 611130 四*** | 國省代碼： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 pcr 提取 毛發 基因組 dna 試劑盒 及其 應用 | ||
1.一種PCR儀法提取毛發基因組DNA的試劑盒，其特征在于包括：
毛發預處理液、毛發緩沖液和蛋白酶K溶液；所述毛發預處理液為體積分數75％的乙醇溶液，所述毛發緩沖液由250μL的Tween20、5mL?10×PCR?buffer、5mL?25mmol?MgCl2和20μL?10mmol/L?CaCl2組成。
2.根據權利要求1所述的一種PCR儀法提取毛發基因組DNA的試劑盒，其特征在于所述蛋白酶K溶液的濃度為20mg/mL。
3.如權利要求1所述的試劑盒在提取毛發基因組DNA中的應用。
4.根據權利要求3所述的試劑盒在提取毛發基因組DNA中的應用，其特征在于包括下述步驟：
(1)將帶毛囊的預提基因組DNA毛發樣本采用體積分數為75％的乙醇溶液清洗2次，然后用蒸餾水沖洗3次；
(2)取清洗好的毛發樣本，將其含毛囊端3～5mm剪下，放人200μL離心管；
(3)在200μL離心管的加入100μL毛發緩沖液和5μL蛋白酶K；所述毛發緩沖液由250μL的Tween20、5mL?10×PCR?buffer、5mL?25mmol/L?MgCl2和20μL?10mmol/L?CaCl2組成；
(4)將上述200μL離心管放在PCR儀上進行反應，程序為58℃下反應60min；75℃下反應30min；
(5)將上述反應后的200μL離心管內獲得的基因組DNA分裝貯存在-4℃下保存30～60min。
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