[發明專利]一種能靶向抑制ERK信號通路的抗腫瘤多肽及其應用

有效

• 申請號: 201510036658.2
• 申請日: 2015-01-26
• 公開（公告）號: CN104610435B
• 公開（公告）日: 2017-12-19
• 發明（設計）人: 潘春武
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬新華醫院
• 主分類號: C07K14/00
• 分類號: C07K14/00;C12N15/11;A61K38/16;A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙)31262
• 代理人: 金重慶

技術領域

本發明涉及分子生物學及生物醫藥技術領域，具體地說，涉及一種能靶向抑制ERK信號通路的抗腫瘤多肽及其應用。

背景技術

磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)是目前發現的最為重要的促進細胞生長以及腫瘤發生、發展的信號通路之一，因此，很多臨床前或臨床中正在使用的藥物，包括化療藥、靶向治療藥物等都被設計或者被證明通過抑制AKT信號途徑從而達到抗腫瘤的效果。

但人們發現，這類藥物在經過初期較好的抗腫瘤效應后，往往會產生藥物耐受而失效。我們的研究發現，使用PI3K/AKT的抑制劑，如MK2206、NVP-BEZ235處理前列腺癌細胞后，雖然能顯著抑制AKT的激活，但卻會導致細胞外信號調節蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases，ERK)信號通路的激活，兩者之間存在負反饋調節平衡，見圖1。除此之外，該種負反饋調節平衡還存在于乳腺癌、結腸癌、直腸癌等其他類型腫瘤中。

ERK是絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)的最重要的亞家族成員，而MAPK也是目前已知的重要的促細胞生長、促腫瘤信號通路。這提示我們，ERK被負反饋激活是PI3K/AKT抑制劑出現耐藥的重要分子生物學機制。

然而，目前AKT與ERK信號途徑之間的負反饋調節機制仍不清楚，也未見使用PI3K/AKT抑制劑抗腫瘤治療的同時通過抑制ERK信號通路來提高藥物治療效果的相關報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種能靶向抑制ERK信號通路的抗腫瘤多肽。

本發明提供了一種多肽，所述的多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本發明提供了一種分離的核酸分子，它編碼序列如SEQ ID NO.2所示的多肽。

作為本發明的一個優選例，所述的核酸分子的序列如SEQ ID NO.3所示。

本發明提供了一種表達載體，所述的表達載體包含有如上所述的核酸分子。

本發明提供了一種藥物組合物，它含有序列如SEQ ID NO.2所示的多肽，和藥學上可接受的載體。

作為本發明的一個優選例，所述的藥物組合物還包含PI3K/AKT抑制劑或紫杉醇類藥物。

本發明提供了所述的多肽、所述的核酸分子、所述的表達載體或所述的藥物組合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。

作為本發明的一個優選例，所述的腫瘤中AKT與ERK信號途徑之間存在負反饋調節。

更優選地，所述的腫瘤為前列腺癌、乳腺癌、結腸癌、直腸癌、胃癌、食管癌、鼻咽癌、肺癌、宮頸癌、子宮內膜癌、腎癌或胰腺癌。

本發明還提供了所述的多肽、所述的核酸分子、所述的表達載體或所述的藥物組合物在制備藥物中的應用，所述的藥物用于克服PI3K/AKT抑制劑或紫杉醇類藥物在抗腫瘤治療過程中出現的耐藥。

本發明優點在于：本發明構建了一個靶向抑制ERK信號通路的小分子多肽P2SE，通過一系列生物學實驗證明P2SE在多種腫瘤(前列腺癌、乳腺癌、結腸癌、直腸癌)中均能有效克服PI3K/AKT抑制劑或紫杉醇類藥物在抗腫瘤治療過程中出現的耐藥，有顯著的協同抗腫瘤作用。由于ERK信號通路存在于多種腫瘤中，是促進細胞生長以及腫瘤發生、發展的重要信號通路之一，因此小分子多肽P2SE可用于此類腫瘤的治療，優選與PI3K/AKT抑制劑或紫杉醇類藥物聯合使用。

附圖說明

圖1.LNCaP、C4-2、C4-2B為三種前列腺癌細胞。MK2206：0.5μM，NVP-BEZ23550nM，處理24小時后收集細胞提取蛋白，western blot檢測。顯示MK2206、NVP-BEZ235處理前列腺癌細胞后，雖然能顯著抑制AKT的激活，但卻會導致ERK信號通路的激活。

圖2.能與支架蛋白IQGAP1的CC結構域結合的FOXO1片段的氨基酸序列的鑒定。

圖3.pCMV-HA載體圖譜。

圖4.CHX 10μg/ml，預處理30min，MK22060.5μM，處理6小時后收集細胞提取蛋白，western blot檢測。

圖5.MK22060.5μM，持續處理48小時，MTS檢測吸光度。

圖6.MK22060.5μM，處理6小時后收集細胞提取蛋白，western blot檢測。