[發(fā)明專利]一種人血清氧化低密度脂蛋白的免疫比濁檢測試劑盒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201510035984.1
• 申請日: 2015-01-23
• 公開（公告）號: CN104597252A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 梅義武;劉興;章凌彬;葉佳穎
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江卓運(yùn)生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33239
• 代理人: 胡小永

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物檢測領(lǐng)域，具體而言，涉及檢測一種人血清中氧化低密度脂蛋白的免疫比濁試劑盒。

背景技術(shù)

心血管疾病是嚴(yán)重危害我國和世界人民生命健康的一類疾病，其患病率和死亡率都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于腫瘤等其他疾病，是危害人類健康和生命安全的第一殺手。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)告指出，全球所有死亡原因的1/3是由心腦血管疾病引起的，其發(fā)病率是各種疾病之首。

在我國，據(jù)國家心血管病中心發(fā)布的《中國心血管病報(bào)告2013》顯示，心血管病的患病率處于持續(xù)上升階段，全國心血管病患者約2.9億，即每5個(gè)成人中就有1人患有心血管病。每年約有350萬人死于心血管病，占總死亡率的41％，居各種疾病之首，即每10秒有1人死于心血管疾病。其中由血脂異常引發(fā)的心血管疾病呈逐年上升的趨勢，我國血脂異常患者至少為2.5億，患病率為18.6％，占心血管疾病總數(shù)的86.2％，而浙江地區(qū)近半數(shù)的成年居民血脂異常，且患病人群年輕化趨勢明顯。

血脂異常作為脂質(zhì)代謝障礙性疾病，主要損害心血管系統(tǒng)，導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(coronary?atherosclerotic?heart?disease，CHD)——冠心病及其他動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的發(fā)生，是心血管病的主要危險(xiǎn)因素之一。

近期研究發(fā)現(xiàn)，天然LDL中的不飽和脂肪酸在自由基或其他氧化劑作用下生成脂類自由基，這些脂類自由基作為引發(fā)劑，引發(fā)脂質(zhì)過氧化的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，生成多種活性醛。這些化學(xué)性質(zhì)活潑的醛與LDL中的載脂蛋白apoB結(jié)合產(chǎn)生新的抗原決定簇，進(jìn)而形成氧化低密度脂蛋白(oxidized?LDL，oxLDL)，其性質(zhì)較天然LDL已發(fā)生明顯改變，不能通過LDL受體途徑進(jìn)行代謝，而由oxLDL受體識別后內(nèi)吞入巨噬細(xì)胞，從而使膽固醇酯在巨噬細(xì)胞中大量堆積而形成泡沫細(xì)胞，泡沫細(xì)胞因攝取大量的oxLDL而造成脂質(zhì)堆積時(shí)即會(huì)發(fā)生壞死崩解，此過程一方面形成粥樣硬化斑塊壞死的核心，進(jìn)一步地造成動(dòng)脈粥樣硬化早期病變脂紋的形成；另一方面也將oxLDL等氧化的脂質(zhì)和蛋白質(zhì)釋放入循環(huán)血液，成為血漿中可以檢測到的oxLDL，粥樣硬化的斑塊越大、越多，滲透至血液中的oxLDL也越多。因此，循環(huán)血液中的oxLDL的量可以反應(yīng)動(dòng)脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度，特別是與冠心病密切相關(guān)。

大量的科學(xué)研究已證實(shí)oxLDL是比年齡、高血壓、糖尿病、吸煙等更為重要的冠心病獨(dú)立危險(xiǎn)因素。因此對oxLDL的檢測和監(jiān)視是預(yù)防和控制心血管疾病尤其是冠心病的重要內(nèi)容。

目前，國內(nèi)外對oxLDL的檢測方式主要有酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)、共軛雙烯檢測法和核磁共振(NMR)法。但是共軛雙烯檢測法和NMR法的檢測儀器設(shè)備較為昂貴，且操作復(fù)雜，限制了其應(yīng)用。而ELISA的檢測方法存在操作復(fù)雜、耗時(shí)長等缺點(diǎn)，而正逐漸被自動(dòng)化、快速化的全自動(dòng)檢測方法所代替。

免疫比濁法是一種新型的免疫檢測技術(shù)，它的檢測原理是抗原抗體凝集成復(fù)合物而使反應(yīng)體系產(chǎn)生一定的濁度，濁度大小與樣品中被檢物質(zhì)的濃度成正比，在一定波長下測定濁度，即可測得樣品中被檢物質(zhì)的含量。免疫比濁法可在全自動(dòng)生化分析儀上使用，不但明顯的縮短了檢測時(shí)間，提高了檢測效率，并且在一定程度上減少了人工操作而引入的人為誤差，使其在臨床上得到了較好的推廣。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種人血清氧化低密度脂蛋白的免疫比濁檢測試劑盒，該試劑盒靈敏度高、精密度好，適用于全自動(dòng)生化分析儀。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

本發(fā)明人血清氧化低密度脂蛋白的免疫比濁檢測試劑盒包括試劑1和試劑2，所述試劑1包括：10-50mmol/L的緩沖液、0.01-0.1％w/v的聚乙二醇、0.01-0.05％w/v的防腐劑；所述試劑2包括：0.1-0.5％w/v標(biāo)記有抗人氧化低密度脂蛋白抗體的膠乳顆粒、0.5-5％w/v的穩(wěn)定物質(zhì)、10-50mmol/L的緩沖液、0.01-0.05％w/v的防腐劑。

所述膠乳顆粒直徑為50nm～200nm,優(yōu)選直徑為100-120nm。

所述緩沖液為磷酸鹽緩沖液、硼酸鹽緩沖液、Tris緩沖液、HEPES緩沖液、MES中的一種或多種；所述緩沖液pH值為6.5-8.5。所述緩沖液可以為其他具有相似特征的緩沖液。