[發明專利]用于檢測結腸直腸癌的SDC2甲基化

有效

• 申請號: 201510033764.5
• 申請日: 2010-10-14
• 公開（公告）號: CN104673896B
• 公開（公告）日: 2019-01-11
• 發明（設計）人: 安城皖;文永鎬;吳泰禎;鄭賢哲
• 申請（專利權）人: 基因特力株式會社
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 陳桉

本發明涉及用于檢測結腸直腸癌診斷用的結腸直腸癌特異性甲基化標志物基因的甲基化的方法，尤其涉及檢測結腸直腸癌特異性標志物基因的方法，該基因在結腸直腸癌細胞中被特異性地甲基化，從而為診斷結腸直腸癌提供信息。用于檢測甲基化的所述創造性方法和用于診斷結腸直腸癌的所述創造性組合物、試劑盒以及核酸芯片的應用，使得在轉化早期診斷結腸直腸癌成為可能，從而能夠在早期診斷結腸直腸癌。另外，所述創造性方法使結腸直腸癌能以與傳統方法相比更準確而快速的方式有效地診斷。

本申請是中國專利申請201080056594.8的分案申請。

技術領域

本發明涉及用于檢測結腸直腸癌診斷用的結腸直腸癌特異性甲基化標志物基因的甲基化的方法，尤其涉及檢測結腸直腸癌特異性標志物基因的方法，該基因在結腸直腸癌細胞中被特異性地甲基化，從而為診斷結腸直腸癌提供信息。

背景技術

即便是在醫學科學進步的當今時代，癌癥患者，尤其是實體瘤患者(不同于血液癌患者)的5年生存率也低于50％，且全部癌癥患者中的大約2/3都在晚期確診，并且幾乎全都在癌癥診斷后的兩年內去世。癌癥治療中這樣的糟糕結果不僅是治療方法的問題，還歸因于早期癌癥診斷、晚期癌癥的確診以及對癌癥治療后癌癥患者的后續追蹤的不易。

目前的臨床實踐中，經病史詢問、身體檢查和臨床評估，如果疑似患有癌癥，再以放射線檢測和內窺鏡檢查，之后才通過組織活檢確診為癌癥。然而，只有當癌細胞數量超過十億，且癌直徑大于1cm時，通過現有的臨床實踐診斷癌癥才是可能的。這種情況下，癌細胞已經具備了轉移能力，并且其中至少半數已經轉移。同時，用于監測由癌癥直接或間接產生的物質的腫瘤標志物被用于癌癥篩查，但它們由于準確性有限會造成干擾，因為其中多達半數的腫瘤標志物甚至在癌癥存在的情況系下也表現為正常，卻經常在甚至未患癌癥的情況下表現為陽性。另外，主要用于癌癥治療的抗癌劑具有只在癌體積較小時才有效的問題。

癌癥難以診斷和治療的原因在于，癌細胞的高度復雜性和可變性。癌細胞過度且持續生長，侵害周圍組織，并轉移至遠端器官，導致死亡。盡管有免疫機制的攻擊或抗癌治療，癌細胞依然存活，持續發展，且最適于存活的細胞群選擇性繁殖。癌細胞是具有高度生存力的活體，它的發生是由大量基因的突變所致。為使一個細胞轉變成癌細胞，并發展成臨床可檢測的惡性癌瘤塊，必須發生大量基因突變。因此，為了從根本上診斷和治療癌癥，需要基因水平的治療途徑。

近來，人們積極地嘗試遺傳分析技術來診斷癌癥。最簡單的典型方法是用PCR檢測血液中ABL：BCR融合基因(白血病的遺傳特征)的存在。該方法準確率超過95％，且在使用這一簡單易行的遺傳分析來診斷和治療慢性粒細胞白血病后，該方法還被用于結果評估和后續研究。然而，該方法的缺陷在于，其只能用于某些血液癌。

此外，還嘗試過另一種方法，其中使用RT-PCR和印跡技術來檢測癌細胞表達基因的存在，從而診斷血細胞中癌細胞的存在。然而，該方法的缺點在于，它只能用于一些癌癥，包括前列腺癌和黑色素瘤，且假陽性率高。另外，該方法中難以標準化檢測和讀取，其效用也有限(Kopreski,M.S.et al.,Clin.Cancer Res.,5:1961,1999；Miyashiro,I.et al.,Clin.Chem.,47:505,2001)。