[發明專利]用于生物成像和腦膠質瘤靶向的納米粒子及制備方法和應用有效

申請號：	201510032689.0	申請日：	2015-01-22
公開（公告）號：	CN104667300B	公開（公告）日：	2018-04-24
發明（設計）人：	王鏡;俞磊;趙瀟;肖曄;董素珍;閆志強;王依婷;朱建中;彭暉	申請（專利權）人：	華東師范大學
主分類號：	A61K49/00	分類號：	A61K49/00;C08G65/00
代理公司：	上海藍迪專利商標事務所(普通合伙)31215	代理人：	徐筱梅,張翔
地址：	200241 ***	國省代碼：	上海;31
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摘要：
搜索關鍵詞：	用于生物成像膠質靶向納米粒子制備方法應用
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【說明書】：

技術領域

本發明涉及生物醫學影像和分子靶向技術領域，具體地說是一類生物成像和腦膠質瘤靶向的納米粒子及制備方法和應用。

背景技術

熒光碳點是一種新型的納米材料，尺寸小于10nm，具有準球形結構，表面帶有不同官能團，易于修飾表征。熒光碳點具有獨特的熒光性質，發光具有尺寸和激發波長依賴性，發光穩定且無光漂白現象。同時熒光碳點還具有易于制備、低毒性和良好的生物兼容性等特點。所以，熒光碳點在生物成像，熒光傳感，光催化和有機光伏器件，發光二極管等方面都具有廣泛的應用價值。

腦膠質瘤致死、致殘率高，其預后從70年代以來幾乎無改善，是腫瘤治療領域的最大難題之一。由于血腦屏障的存在，抗癌藥物難以透過血腦屏障，導致治療效果差。此外，抗癌藥物對正常組織有很大的殺傷力，對于沒有癌細胞靶向的治療中，表現出了極大的副作用。因此，對于腦膠質瘤的位置確定和精確治療在研究中有重要意義。

細胞穿透肽(cell-penetrating peptide,CPP)是一類能穿透細胞胞膜或核膜的短肽，該肽段轉導效率高，速度快，生物活性好，對細胞損害小并且能引導與其相連的多肽、蛋白質或其他生物活性分子進入細胞內。CPP膜穿透功能為基礎生命科學研究開辟了一個新領域，很快被應用到蛋白質藥物的靶向和導入技術研究中，為推動基因工程藥物發展，建立高效、安全的蛋白質分子導入技術提供了非常有價值的載體工具。

聚乙二醇(PEG)是一種用途極為廣泛的高分子化合物，可以溶解在水和多種溶劑中，且具有優異的生物相容性，在體內能溶于組織液中，從而被機體迅速排除體外而不產生毒副作用。當把PEG或其衍生物和其它分子偶合時，它的優良性質也會隨之轉移到結合物中。同時，雙官能團的結構，讓PEG衍生物稱為連接不同分子的重要橋梁。

發明內容

本發明的目的是提供一系列通過不同長度PEG連接腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)形成的納米粒子，探究靶向于腦膠質瘤后呈現的生物影像，實現腦膠質瘤的可視化。

本發明的另一目的是提供一種所述通過不同長度PEG實現腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)連接的納米粒子的制備方法。

本發明的再一目的是提供一種所述通過不同長度PEG連接腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)形成的納米粒子在腦膠質瘤生物成像中的應用。

本發明是關于一系列通過不同長度PEG連接腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)形成的納米粒子，這些化合物是在不同長度PEG的兩端引入腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)，并進行連接。它們在腦膠質瘤呈現出良好的生物影像。

本發明所述的通過不同長度PEG連接腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)形成的納米粒子具體結構如通式I所示：

其中，片段一為腫瘤穿透肽(RGERPPR)，片段二為馬來酰亞胺-聚乙二醇-氨基琥珀酰亞胺琥珀酸酯(MAL-PEG-NHS)，片段三為熒光碳點(CQD)，n的取值范圍5<n<85。

本發明提供了一種所述通過不同長度PEG連接腫瘤穿透肽(RGERPPR)與熒光碳點(CQD)形成的納米粒子的制備方法。該方法包括如下步驟：

1)化合物Ⅱ與馬來酰亞胺-聚乙二醇-氨基琥珀酰亞胺琥珀酸酯(NHS-PEG-Mal)在堿性條件下反應生成化合物Ⅲ；其中堿為三乙胺；溶劑為水；反應溫度為0-40℃；化合物Ⅱ與馬來酰亞胺-聚乙二醇-氨基琥珀酰亞胺琥珀酸酯重量比為1︰4；堿與馬來酰亞胺-聚乙二醇-氨基琥珀酰亞胺琥珀酸酯的重量比為1︰5；

2)化合物Ⅲ與腫瘤穿透肽(RGERPPR)反應生成化合物Ⅰ；其中反應溶劑為N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；反應溫度為0-40℃，化合物Ⅲ與腫瘤穿透肽的重量比為1:5。

本發明的納米粒子在生物成像和腦膠質瘤靶向中的應用。

本發明的納米粒子靶向于腦膠質瘤后呈現良好的生物影像，在臨床上可進行靜脈注射、肌肉注射等方式應用。