[發(fā)明專利]一種液態(tài)復(fù)合微生物菌劑及其生產(chǎn)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510028463.3
• 申請(qǐng)日: 2015-01-21
• 公開（公告）號(hào): CN104593303B
• 公開（公告）日: 2018-02-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 龔三元
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 威海金中元生物肥有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C02F3/34;C12R1/07;C12R1/125;C12R1/10
• 代理公司: 威海科星專利事務(wù)所37202
• 代理人: 于濤

1.一種液態(tài)復(fù)合微生物菌劑的生產(chǎn)方法，其特征在于：所述方法包括以下步驟：

步驟1：將解淀粉芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌三種活性菌株復(fù)合；

步驟2：將上述復(fù)合菌株接入海水養(yǎng)殖池內(nèi)，經(jīng)20~30天后，對(duì)海水進(jìn)行取樣以及處理，所述處理指對(duì)取樣的海水進(jìn)行分離、復(fù)壯、紫外線處理、平板分離、搖瓶培養(yǎng)、活力測定、誘變處理；

步驟3：在壓強(qiáng)不低于0.1MPa，溫度不低于121℃的條件下，將培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理25~35min，其中試管斜面上、茄形瓶斜面上、三角燒瓶中、種子罐中以及發(fā)酵罐中分別設(shè)有所述培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基包括重量比為90~95%的無菌水，重量比為1.0~2.5%的玉米粉，重量比為1.0~2.5%的豆餅粉，重量比為0.1~1.5%的魚粉，重量比為0.02~0.5%的玉米淀粉，重量比為0.005~0.07%的硫酸鎂，重量比為0.03~0.05%的磷酸二氫鉀，重量比為0.02~0.5%的輕質(zhì)碳酸鈣以及重量比為0.002~0.1%的氫氧化鈉；

步驟4：將步驟2中處理得到的三種菌株分別接種至試管斜面上的培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)40~56小時(shí)，溫度控制在35~37℃；

步驟5：將步驟4中處理得到的三種菌株分別接種至茄形瓶斜面上的培養(yǎng)基中，在恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)40~56小時(shí)，溫度控制在35~37℃；

步驟6：將步驟5中處理得到的三種菌株分別接種至三角燒瓶中的培養(yǎng)基中，并且所述解淀粉芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，所述枯草芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，所述地衣芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，在搖床培養(yǎng)14~20小時(shí)，溫度控制在35~37℃；

步驟7：將步驟6中處理得到的三種菌株分別接種至種子罐中的培養(yǎng)基中，并且所述解淀粉芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，所述枯草芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，所述地衣芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，培養(yǎng)8~16小時(shí)，溫度控制在35~37℃；

步驟8：將步驟7中處理得到的三種菌株分別接種至發(fā)酵罐中的培養(yǎng)基中，并且所述解淀粉芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，所述枯草芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，所述地衣芽孢桿菌的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%，接種所述解淀粉芽孢桿菌的培養(yǎng)基在發(fā)酵時(shí)，向發(fā)酵罐中通入無菌空氣的通風(fēng)量為280~320m³/h，發(fā)酵周期為22~26小時(shí)；接種所述枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基在發(fā)酵時(shí)，向發(fā)酵罐中通入無菌空氣的通風(fēng)量為280~320m³/h，發(fā)酵周期為22~26小時(shí)；接種所述地衣芽孢桿菌的培養(yǎng)基在發(fā)酵時(shí)，向發(fā)酵罐中通入無菌空氣的通風(fēng)量為220~280m³/h，發(fā)酵周期為22~26小時(shí)；上述發(fā)酵過程中溫度控制在35~37℃，上述發(fā)酵完成后，每種菌液的有效活菌濃度為80~100億個(gè)/ml；

步驟9：將上述發(fā)酵后的三種菌液按照比例進(jìn)行均勻混合，其中所述解淀粉芽孢桿菌菌液的體積比為60~80%，所述枯草芽孢桿菌菌液的體積比為10~20%，所述地衣芽孢桿菌菌液的體積比為10~20%。

2.一種基于權(quán)利要求1所述的方法制備的液態(tài)復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：所述復(fù)合微生物菌劑包括活性菌株和培養(yǎng)基，其中所述培養(yǎng)基包括重量比為90~95%的無菌水，重量比為1.0~2.5%的玉米粉，重量比為1.0~2.5%的豆餅粉，重量比為0.1~1.5%的魚粉，重量比為0.02~0.5%的玉米淀粉，重量比為0.005~0.07%的硫酸鎂，重量比為0.03~0.05%的磷酸二氫鉀，重量比為0.02~0.5%的輕質(zhì)碳酸鈣以及重量比為0.002~0.1%的氫氧化鈉；所述活性菌株包括解淀粉芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌；在液體培養(yǎng)時(shí)，所述每種活性菌株分別接種至培養(yǎng)基時(shí)，每種活性菌株的體積占培養(yǎng)基體積的1~5%；將發(fā)酵后的三種菌液復(fù)合形成菌劑時(shí)，所述解淀粉芽孢桿菌菌液的體積比為60~80%，所述枯草芽孢桿菌菌液的體積比為10~20%，所述地衣芽孢桿菌菌液的體積比為10~20%。