[發(fā)明專(zhuān)利]一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510027979.6
• 申請(qǐng)日: 2015-01-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104558246B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王勇;陸晴漪;何法
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 武漢理工大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/08
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/08;A61K47/36
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專(zhuān)利代理有限公司42102
• 代理人: 唐萬(wàn)榮

1.一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于，所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料以殼聚糖為載體，葉酸和生物素為配體，利用N-酰化反應(yīng)制備葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于：所述殼聚糖分子量為20000-50000，脫乙酰度≥85％。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料，其特征在于：所述葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料中葉酸和生物素的接枝率均≥5％。

4.一種葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于步驟如下：

1)制備殼聚糖溶液：將殼聚糖溶于醋酸溶液中，得到濃度為5-10mg/mL的殼聚糖溶液，并調(diào)節(jié)pH值至4.7-6.0，備用；

2)制備琥珀酰亞胺基生物素酯：將DCC、NHS與生物素按摩爾比1.2-1.5:1:1混合后于50-60℃條件下反應(yīng)16-24h，過(guò)濾后在冰浴條件下向?yàn)V液中滴加乙醚析出沉淀，然后用異丙醇對(duì)沉淀進(jìn)行重結(jié)晶，過(guò)濾收集結(jié)晶并用DMF溶解結(jié)晶，過(guò)濾后逐滴加入無(wú)水乙醚中，冷藏過(guò)夜，移走上清液，室溫下真空干燥得到琥珀酰亞胺基生物素酯，備用；

3)制備具有氨基反應(yīng)活性的葉酸活性酯溶液：將葉酸溶于無(wú)水DMSO中，并加入EDC.HCl，在避光條件下于25-40℃磁力攪拌反應(yīng)1-4h，得到葉酸活性酯溶液，濃度以葉酸質(zhì)量濃度計(jì)為26-44mg/mL，備用；

4)將步驟2)所得琥珀酰亞胺基生物素酯溶于DMF中，得到濃度為20-34mg/mL的生物素酯溶液，在磁力攪拌條件下，將生物素酯溶液緩慢加入步驟1)所得殼聚糖溶液中，在室溫條件下反應(yīng)至反應(yīng)液澄清，然后在攪拌條件下緩慢加入步驟3)所得葉酸活性酯溶液，在室溫下繼續(xù)反應(yīng)12-24h，反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液移入透析袋，于蒸餾水中透析3d，每6h換水一次，透析后經(jīng)冷凍干燥即得到葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于：步驟3)所述葉酸與EDC.HCl的摩爾比為1:5-10。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的葉酸/生物素修飾的殼聚糖材料的制備方法，其特征在于：步驟4)所述琥珀酰亞胺基生物素酯與殼聚糖的摩爾比為20-30:1；所述葉酸活性酯與殼聚糖的摩爾比為20-30:1。