[發明專利]啤酒花總黃酮提取物、制備方法及其作為制備預防和治療肝損傷、癌癥藥物的應用

有效

• 申請號: 201510027779.0
• 申請日: 2015-01-20
• 公開（公告）號: CN104586945B
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發明（設計）人: 李寧;魏秀巖;張向榮;李佳媛;趙葉利
• 申請（專利權）人: 沈陽藥科大學
• 主分類號: A61K31/12
• 分類號: A61K31/12;A61K36/60;A61P1/16;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 靳玲

本發明屬于醫藥技術領域，涉及啤酒花總黃酮提取物物制備方法及其在保肝、抑制腫瘤細胞生長、醌還原酶誘導等方面的應用。可用于預防和治療肝損傷、癌癥藥物的開發。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及啤酒花(Humunus Lupulus L)總黃酮、制備方法和用于制備預防和治療肝損傷、癌癥藥物的應用。

背景技術

啤酒花(Humulus Lupulus L.)又稱忽布，香蛇麻，性味甘苦，微平。是桑科葎草屬多年生草質蔓生藤本,雌雄異株,花單性,雌性球穗花序簡稱酒花。它是一種較耐寒不耐熱的植物,主要分布于我國西北地區、新疆北部、東北、華東及山東、甘肅、陜西等地。目前,我國啤酒花產量約占全世界的13％,僅次于美國和德國,居世界第三位。

啤酒花是釀造啤酒的主要原料之一，它能夠賦予啤酒特殊的苦味和獨特的風味，增強啤酒的非生物穩定性和泡持性，并具有一定的防腐性能，被譽為“啤酒的靈魂”。除主要用于啤酒釀造外，啤酒花作為一種重要的藥用植物，它的應用歷史也很悠久。13世紀開始，啤酒花開始作為草藥來使用。我國明代李時珍的《本草綱目》所引的宋代《開寶本草》中的一種中藥“陀得花”指的就是啤酒花。據報道，啤酒花可用于防腐、健胃、安神、鎮定、催眠、殺菌、抗炎和利尿，還可用于治療消化不良、失眠、肺結核、麻風病等。

近年來對啤酒花提取物或其中所含有的化合物的藥理作用多集中在抗菌、抗氧化、鎮靜和雌激素樣作用等方面。對啤酒花中的主成分啤酒花總黃酮的保肝和癌癥化學預防、治療方面尚未報道。

發明內容

本發明的目的在于提供啤酒花總黃酮提取物，主要由黃腐酚、黃腐酚B、黃腐酚C、黃腐酚G、黃腐酚I組成，其中黃腐酚含量>60％。

本發明的目的還在于提供啤酒花總黃酮制備方法。該方法包括如下步驟：

(1)干燥啤酒花，粉碎后用乙醇或甲醇提取，減壓回收提取液得粗提物；

(2)將上述提取物經非極性大孔吸附樹脂處理，用溶劑進行梯度洗脫，收集合并含啤酒花總黃酮的洗脫液，減壓濃縮，得啤酒花粗總黃酮；

或將上述提取液依次用石油醚或環己烷、二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯萃取，減壓濃縮二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯萃取液得啤酒花粗總黃酮；

(3)步驟(2)所得啤酒花粗總黃酮經聚酰胺柱色譜處理，用溶劑進行梯度洗脫，收集合并含啤酒花總黃酮的洗脫液，減壓濃縮，干燥，得精制啤酒花總黃酮；

或將啤酒花粗總黃酮經硅膠柱色譜處理，用有機溶劑進行梯度洗脫，收集合并含啤酒花總黃酮的洗脫液，減壓濃縮、干燥得精制啤酒花總黃酮。

本發明提供的啤酒花總黃酮制備方法，其中步驟(1)中所述的提取方法為加熱回流提取或加熱超聲提取1-3次。所用溶劑為：體積濃度為60％-100％的乙醇或甲醇。藥材與溶劑重量體積比為1:5～1:15，優選1:6～1:10。步驟(2)中所述大孔吸附樹脂洗脫劑為甲醇/水或乙醇/水，混合體積比例為1：9～9：1，甲醇/水或乙醇/水混合體積比優選3：7～7：3。步驟(2)用石油醚或環己烷、二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯依次萃取的次數為1-4次，萃取溶劑與提取液的體積比為1:1～3:1。

步驟(3)中所述聚酰胺柱色譜流動相為甲醇和水混合溶劑、或乙醇和水混合溶劑，混合溶劑體積比為1：9～9：1，甲醇和水混合溶劑或乙醇和水混合溶劑體積比優選3：7～7：3洗脫部分得啤酒花總黃酮。

步驟(3)中所述硅膠柱色譜流動相為二氯甲烷和丙酮、氯仿和丙酮、二氯甲烷和甲醇、氯仿和甲醇、二氯甲烷和乙酸乙酯或氯仿和乙酸乙酯混合溶劑，混合溶劑體積比為比例為100：1～1：1，優選20：1～3:1洗脫部分得啤酒花總黃酮。

本發明提供的總黃酮具有保肝、抑制腫瘤細胞生長、醌還原酶誘導作用，可用于預防和治療肝損傷、癌癥藥物的開發和應用。