[發明專利]一種用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201510026436.2
• 申請日: 2015-01-19
• 公開（公告）號: CN104530441B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 張黎明;龐家棟;莊寶雄;王捷
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C08G81/00
• 分類號: C08G81/00;A61K47/36;A61K48/00;C12N15/87;C12N15/85
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司44245
• 代理人: 裘暉

1.一種用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟：

(1)將干燥直鏈淀粉與1-疊氮-環氧丙烷混合溶于氫氧化鈉水溶液中，在30～40℃條件下避光攪拌24～36h；反應結束后，將反應產物透析，過濾，冷凍干燥得到含疊氮基團的直鏈淀粉；

所述干燥直鏈淀粉是將直鏈淀粉置于真空干燥箱中，在50～80℃條件下干燥12～48小時得到；所述1-疊氮-環氧丙烷和直鏈淀粉中糖環的摩爾比為1：(1～2)；所述氫氧化鈉水溶液的濃度為每100毫升水中加入0.4～0.8克氫氧化鈉計；所述氫氧化鈉水溶液的使用量以每100毫升氫氧化鈉水溶液溶解0.5～1克干燥直鏈淀粉；所述透析條件為14000截流量透析袋透析48～72小時；

(2)將3代含炔基樹枝狀聚賴氨酸與步驟(1)所得含疊氮基團的直鏈淀粉混合溶于無水二甲基亞砜；在溫度為5～35℃的條件下通入N₂保護15～30分鐘，然后加入五水硫酸銅和抗壞血酸鈉，升溫至40～50℃反應24～48小時；反應結束后將產物透析，冷凍干燥，得到用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(2)所述3代含炔基樹枝狀聚賴氨酸是按專利號為ZL201210005079.8的中國發明專利中權利要求1步驟(2)“含炔基的樹枝狀聚賴氨酸的合成”所述的方法制備得到的。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：步驟(2)所述含疊氮基團的直鏈淀粉中的糖環、3代含炔基樹枝狀聚賴氨酸、五水硫酸銅、抗壞血酸鈉的摩爾比為1：(8～10)：(1～1.2)：(2～2.5)；所述無水二甲基亞砜的制備方法按照以下操作步驟：將氫化鈣加入到二甲基亞砜中攪拌6～24小時，減壓蒸餾，得到無水二甲基亞砜，所述氫化鈣的加入量以每500毫升二甲基亞砜中加入1～2克計；所述無水二甲基亞砜的使用量以平均每0.5～1克含疊氮基團的直鏈淀粉使用100毫升無水二甲基亞砜計；所述透析條件為14000截流量透析袋透析48～72小時。

4.一種根據權利要求1～3任一項所述制備方法得到的用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物。

5.根據權利要求4所述的用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物在制備基因和抗腫瘤藥物共傳遞物質中的應用。

6.根據權利要求5所述的應用，其特征在于按照以下操作步驟：

(1)將用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物溶解于去離子水中配置成5～10毫克/毫升的水溶液，加入姜黃素，超聲30～60分鐘并在溫度為5～35℃的條件下攪拌12～24小時；將樣品用透析袋透析，然后過濾，冷凍干燥得到包合物；

(2)將包合物溶解于PBS緩沖液中，加入質粒DNA，混合均勻后于37～40℃條件下靜置15～30分鐘，使包合物與質粒DNA形成穩定的復合物。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：所述用于基因和抗腫瘤藥物共傳遞的直鏈淀粉改性物與姜黃素的質量比為1：(1～1.5)；所述透析條件為14000截流量透析袋透析6～12小時。

8.根據權利要求6所述的應用，其特征在于：步驟(2)所述PBS緩沖液pH值為7.2～7.4；所述PBS緩沖液的使用量以每10毫升PBS緩沖液加入5～10克包合物計；所述質粒DNA在復合物中的濃度為0.2～0.8微克/微升。