[發明專利]一種高溫細菌地衣芽孢桿菌及其防治煙葉霉變應用

有效

• 申請號: 201510025323.0
• 申請日: 2015-01-19
• 公開（公告）號: CN105018369B
• 公開（公告）日: 2018-06-19
• 發明（設計）人: 賴泳紅;崔曉龍;王永霞;肖煒;張家偉;李治瀅;王曉峰
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/10
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本發明公開了一種高溫細菌地衣芽孢桿菌及其防治煙葉霉變應用。本發明屬于農業微生物技術領域，也涉及防治倉儲陳化煙葉霉變的技術領域。所述的防治煙葉霉變菌株命名為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）B?3，已在保藏單位保藏，保藏單位名稱：中國典型培養物保藏中心，簡稱CCTCC，保藏日期為2014年10月20日，保藏編號為CCTCC NO：M 2014499。本發明的地衣芽孢桿菌B?3是一種分離于玉溪煙廠陳化煙葉的高溫細菌，防治倉儲煙葉霉變效果顯著，具有對人、畜安全，環境友好，提高倉儲煙葉品質等優點。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域和防治倉儲陳化煙葉霉變的技術領域，具體地說，本發明涉及利用一種人工分離的高溫微生物菌株，該微生物適用于防治倉儲陳化煙葉霉變。所述的高溫微生物是高溫細菌地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）B-3。本發明還包括該微生物防治倉儲陳化煙葉霉變的應用。

背景技術

倉儲煙葉霉變是個全球性的問題，在煙葉倉儲損耗中占很大的比例，每年損失巨大。目前，在防治倉儲煙葉霉變方面的技術措施主要有控制煙葉入庫水分含量、控制倉庫空氣相對濕度、倉庫噴灑化學藥劑消毒、改善煙葉包裝條件等。這些措施雖然對減少煙葉霉變起到一定作用，但在實際生產中，很難達到理想的倉儲環境條件，煙葉中的霉菌一旦遇到適宜的溫濕度條件，煙葉就會發生霉變，并迅速蔓延。

據報道，引起倉儲煙葉霉變的微生物類群有130屬231種，類群十分復雜，這可能也是煙葉霉變防治難的原因。目前利用生物方法防治煙葉霉變的研究不多，使用化學藥劑預防煙葉霉變有較好的效果，但隨著吸煙與健康問題的引入，化學藥劑污染環境以及殘留問題急需解決，最好的防治方法就是進行生物防治，研究表明微生物防治方法是一種比較有效環保的方法，利用生物之間產生拮抗的機理，可以通過拮抗菌株抑制煙葉霉變。

目前國內相關研究還比較少，朱大恒等研究證明烤煙葉面優勢菌種混合配制成生物制劑(TFA)具有抑制煙葉霉變的作用，韓錦峰等將分離篩選到的幾株優勢菌混合配制成生物制劑(TFA)用于煙葉發酵，結果發現TFA既可加速烤煙發酵，提高煙葉品質，同時具有抑制煙葉霉變的作用。李梅云等利用煙葉上的優勢菌來抑制煙葉霉變菌株，但效果不穩定。

煙葉的儲藏階段會“發熱出汗”，它是煙葉的陳化階段，也是煙葉極易發生霉變的時期。倉儲階段是在一個相對較高溫度下進行的，關于高溫細菌防治煙葉霉變的研究鮮見報道，高溫細菌可以在高溫環境中仍有很好的活力，可望獲得較好的煙葉防霉變效果。來源于陳化煙葉的高溫細菌，在倉儲陳化煙葉上生長有更強的適應性優勢，抑制煙葉霉變有很好的前景。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，針對目前倉儲煙葉霉變不易得到很好控制，提供一株適用于防治倉儲陳化煙葉霉變的高溫微生物即地衣芽胞桿菌的新菌株，利用該微生物地衣芽孢桿菌B-3菌株能夠防治倉儲煙葉霉變，提高倉儲陳化煙葉品質。

本發明所述地衣芽孢桿菌B-3系從云南玉溪煙廠陳化煙葉中分離獲得，為一種防治倉儲陳化煙葉霉變的高溫細菌菌株，已在保藏單位保藏，保藏單位名稱：中國典型培養物保藏中心，簡稱CCTCC，保藏日期為2014年10月25日，保藏編號為CCTCC NO：M 2014499。

本發明所述高溫細菌地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis ）B-3應用于防治倉儲陳化煙葉霉變。

本發明所述的地衣芽孢桿菌B-3菌株經PCR技術，DNA測序儀分析，該菌株的16SrDNA序列由1430個堿基組成。

用BLAST程序對B-3菌株的16S rDNA序列和GenBank中已登錄的16S rDNA序列進行核苷酸同源性比較，結果與已報道的地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）(登錄號FJ641025)的16S rDNA序列同源性達到99.9％ 。