[發(fā)明專利]一種酶促化學發(fā)光試劑組合物

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510025311.8
• 申請日: 2015-01-16
• 公開（公告）號: CN104531140A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發(fā)明（設計）人: 王國平;丁士進
• 申請（專利權）人: 王國平;丁士進
• 主分類號: C09K11/06
• 分類號: C09K11/06;G01N33/53
• 代理公司: 上海信好專利代理事務所(普通合伙) 31249
• 代理人: 張靜潔;賈慧琴

技術領域

本發(fā)明屬于酶免疫檢測領域，涉及一種化學發(fā)光試劑，具體來說，涉及一種酶促化學發(fā)光試劑組合物。

背景技術

????AMPPD作為國際公認的第三代化學發(fā)光底物，現(xiàn)在已有成熟穩(wěn)定的配方，該配方試劑已經廣泛地應用于大型自動化免疫分析儀上。然而，?AMPPD底物與堿性磷酸酶在室溫下反應發(fā)光比較緩慢，通常需要在37℃的條件下，反應1小時才能達到最大值。因此，該配方試劑在應用上受到一些限制。AMPPD（化學發(fā)光底物I）具有如下結構：

。該AMPPD化學發(fā)光反應的中間體為中間體1，其結構為：

。

新一代的酶促化學發(fā)光底物CPD?Star?（化學發(fā)光底物II）具有如下結構：

。其化學發(fā)光反應的中間體具有如下結構：

。對比上述AMPPD與CPD?Star的分子結構可以看出，由于CPD?Star分子中多兩個氯原子，它們具有拉電子的效應，當?shù)孜锱c酶反應脫去磷酸基后，其中間體2能比AMPPD的中間體1更快速分解，使底物CPD?Star具有更快的反應速率和更高的發(fā)光強度。

雖然已知CPD?Star具有比AMPPD更快的發(fā)光速度和更高的發(fā)光強度，目前已經也將其開始應用于自動化酶免疫分析儀上。但目前所使用的產品主要是用添加增強劑的配方技術，而沒有發(fā)揮這個新穎化學發(fā)光底物的最佳性能。

因此，亟需開發(fā)一種化學發(fā)光試劑組合物，以充分發(fā)揮CPD?Star作為發(fā)光底物的最佳性能。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的是通過能量轉移的方法，提出一種與傳統(tǒng)增強劑配方完全不同的配方技術，充分發(fā)揮CPD?Star作為發(fā)光底物的最佳性能。

為達到上述目的，本發(fā)明提供了一種酶促化學發(fā)光試劑組合物，該組合物包含酶促化學發(fā)光底物II、長鏈季鹽表面活性劑及熒光表面活性劑，該酶促化學發(fā)光底物II具有如下的結構：

。

上述的組合物，其中，所述的長鏈季鹽表面活性劑具有如下的通式：

；

其中，R₁、R₂?和?R₃?為C1-10的烷基或芐基中的任意一種，R₁、R₂?和?R₃相同或不同；X^-為氟、氯、溴、碘或甲磺酸根；Z為氮或磷原子。

上述的組合物，其中，所述的季鹽表面活性劑通式中的R₁、R₂?和?R₃?為甲基、乙基、丙基或芐基中的任意一種。

上述的組合物，其中，所述的熒光表面活性劑具有如下的通式：

。

上述的組合物，其中，所述的熒光表面活性劑具有如下的通式：

。

上述的組合物，其中，所述的熒光表面活性劑具有如下的通式：

。

上述的組合物，其中，所述的熒光表面活性劑具有如下的通式：

。

上述的組合物，其中，所述的組合物還包含pH為8-11的磷酸緩沖液，化學發(fā)光底物的濃度為0.01-20毫摩爾/升。

上述的組合物，其中，還包含鎂鹽，其中，鎂鹽的濃度為0.1-20毫摩爾/升，所述的長鏈季鹽表面活性劑的濃度為0.1-50毫摩爾/升，所述的熒光表面活性劑的濃度為0.05-20毫摩爾/升。

上述的組合物，其中，所述的組合物中，所述的鎂鹽包含醋酸鎂、氯化鎂或溴化鎂。

在酶免疫檢測方法中，一個高靈敏、低噪聲的檢測試劑是非常重要的組成部分。本發(fā)明提供了一種新穎的化學發(fā)光試劑組合物，應用于酶免疫檢測，其具有酶免疫檢測所需的低噪音和高靈敏度的特點，可廣泛應用于大型自動化酶免疫分析儀。本發(fā)明的化學發(fā)光試劑組合物具有如下優(yōu)點：（1）底物用量減少到原傳統(tǒng)配方用量的十分之一。（2）檢測波長范圍變窄，即為530~540?納米之間，避免了傳統(tǒng)化學發(fā)光所發(fā)出的460~470納米波長光的干擾，大大降低了檢測噪音，提高了檢測信噪比。因此，本發(fā)明的化學發(fā)光試劑比傳統(tǒng)的化學發(fā)光試劑具有更優(yōu)異的性能。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的酶促化學發(fā)光試劑組合物用于酶免疫檢測原理圖。

圖?2?為本發(fā)明的實施例具體使用的一個表面活性劑的結構式。

圖?3為本發(fā)明的實施例具體使用的?一個熒光表面活性劑的結構式。?

具體實施方式