[發明專利]同時檢測烯草酮CLE和氯酯磺草胺EDP殘留的試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 201510022918.0
• 申請日: 2015-01-16
• 公開（公告）號: CN104714016A
• 公開（公告）日: 2015-06-17
• 發明（設計）人: 王弋博;牛小東;謝曉玲
• 申請（專利權）人: 天水師范學院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 張克勤

1.一種同時檢測烯草酮CLE?和氯酯磺草胺EDP殘留的試紙條，試紙條為膠體金免疫層析試紙條，它包括背板（2）、吸水墊（3）、硝酸纖維膜（4）、結合墊（7）、樣品墊（8），所述背板（2）上依次連續粘附有吸水墊（3）、硝酸纖維膜（4）、結合墊（7）和樣品墊（8），所述樣品墊（8）靠結合墊（7）一端搭接在結合墊（7）上，所述吸水墊（3）上表面吸附有手控區封膜（1），所述樣品墊（8）上表面吸附有樣品端封膜（9），其特征在于：所述硝酸纖維膜（4）上包被有兔抗鼠的IgG質控線（5）和DCL-BSA兩條檢測線（6），結合墊（7）上包被有抗CLE?和EDP?藥物單克隆抗體-膠體金標記物。

2.根據權利要求1所述的同時檢測烯草酮CLE?和氯酯磺草胺EDP殘留的試紙條的制備方法，其特征在于：它包括以下步驟：

步驟一、將半抗原去環酯烯草酮DCL與牛血清白蛋白偶聯合成偶聯物DCL-BSA；

步驟二、將步驟一合成的所述偶聯物DCL-BSA免疫原免疫小鼠，通過細胞融合篩選得到抗CLE?和EDP?藥物單克隆細胞株，分別將得到的抗CLE?和EDP藥物單克隆細胞株注射到小鼠腹腔，得到抗CLE?和EDP?藥物單克隆抗體，該抗體與烯草酮CLE?和氯酯磺草胺EDP有較高的交叉反應；

步驟三、用檸檬酸三鈉與氯金酸反應制備膠體金；

步驟四、提取小鼠IgG免疫健康家兔，得到兔抗鼠IgG抗體；

步驟五、將步驟二制成的所述抗CLE?和EDP?藥物單克隆抗體加入步驟三制備的膠體金中，得到抗CLE?和EDP?單克隆抗體-膠體金標記物；

步驟六、將步驟五制備的所述抗CLE?和EDP?單克隆抗體-膠體金標記物包被在所述結合墊（7）上；

步驟七、將步驟一合成的所述偶聯物DCL-BSA分別包被在所述硝酸纖維素膜（4）中，得到檢測線（6）；

步驟八、將步驟四中制備的所述兔抗鼠IgG抗體包被在所述硝酸纖維素膜（4）中，得到質控線（5）；

步驟九、將所述手控區封膜（1）、所述吸水墊（3）、所述硝酸纖維素膜（4）、所述結合墊（7）、所述樣品墊（8）和所述樣品端封膜（9）依次粘貼在所述背板（2）上，制得同時檢測烯草酮CLE?和氯酯磺草胺EDP殘留的試紙條。