[發(fā)明專利]一株同步利用葡萄糖與木糖生產(chǎn)醇類燃料的菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510021602.X
• 申請日: 2015-01-16
• 公開（公告）號: CN104673712B
• 公開（公告）日: 2021-07-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張杰;張曉東;李巖;華棟梁;許海朋;梁曉輝;趙玉曉;金付強;牧輝;高旻天
• 申請（專利權(quán)）人: 山東省科學(xué)院能源研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/10;C12P7/16;C12R1/145
• 代理公司: 濟南舜源專利事務(wù)所有限公司 37205
• 代理人: 曲志波

1.一株同步利用葡萄糖與木糖生產(chǎn)醇類燃料的菌株的應(yīng)用，其特征是它包括如下步驟：

第一步，配制培養(yǎng)基，包括種子培養(yǎng)基，丁醇基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基；

第二步：一級種子培養(yǎng)；將菌種接入種子培養(yǎng)基中，種子接入前通氮氣驅(qū)除罐中的氧氣，培養(yǎng)溫度37℃，靜置培養(yǎng)16h得一級種子培養(yǎng)液；該菌株為拜氏梭菌SE-2，拉丁文學(xué)名Clostridium beijerinckii SE-2；該菌株已于2014年8月19日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號CCTCC No.M2014384；

第三步：將第二步得到的一級種子培養(yǎng)液按3％體積比轉(zhuǎn)接到二級種子培養(yǎng)基中，種子接入前通氮氣驅(qū)除罐中的氧氣，培養(yǎng)溫度30℃，靜置培養(yǎng)20h得二級種子培養(yǎng)液；

第四步：將二級種子培養(yǎng)液按3％體積比接入含玉米芯水解液的發(fā)酵培養(yǎng)基中，發(fā)酵過程采用厭氧發(fā)酵，種子接入前通氮氣驅(qū)除罐中的氧氣；發(fā)酵培養(yǎng)采用30L攪拌式發(fā)酵罐，裝液量25L，培養(yǎng)溫度37℃，用10M氫氧化鈉控制pH值6.5；

發(fā)酵采用連續(xù)補料發(fā)酵方式，在整個發(fā)酵過程中稀釋率為0.9h^-1，發(fā)酵時間為240h；玉米芯水解液：總糖含量為49.2g/L，其中葡萄糖33.5g/L和木糖15.8g/L。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株同步利用葡萄糖與木糖生產(chǎn)醇類燃料的菌株的應(yīng)用，其特征是種子培養(yǎng)基：葡萄糖40g，牛肉膏2g，酵母粉2g，蛋白胨6g，CH₃COONH₄3g，KH₂PO₄0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.01g，蒸餾水1000mL，pH 6.5，121℃高壓滅菌15min，用無菌氮氣吹5min，驅(qū)盡氧氣。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株同步利用葡萄糖與木糖生產(chǎn)醇類燃料的菌株的應(yīng)用，其特征是丁醇基礎(chǔ)發(fā)酵培養(yǎng)基：玉米芯水解液、K₂HPO₄0.5g、KH₂PO₄0.5g、CH₃COONH₄2.2g、MgSO₄·7H₂O 0.2g、MnSO₄·H₂O 0.01g、NaCl 0.01g、FeSO₄·7H₂O 0.01g、thiamine 0.001g、生物素0.00001g、p-氨基苯甲酸0.001g，加水至1000mL；實際配制時，配制母液1：p-aminobenzoic acid 100mg/L、thiamine 100mg/L、生物素1mg/L、使用無菌0.22μm孔徑的微孔濾膜過濾除菌，然后于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>