[發(fā)明專(zhuān)利]一種低壓低溫提取高活性桑黃多糖的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510014061.8
• 申請(qǐng)日: 2015-01-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104592409B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-07-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬小魁;李樂(lè);王喆之;陳康健;李峻志;宋雙紅;劉陶;陳勇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 陜西師范大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C08B37/00
• 分類(lèi)號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 西安永生專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司61201
• 代理人: 高雪霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種藥用真菌桑黃的活性成分多糖的提取方法。

背景技術(shù)

桑黃又名鮑氏層孔菌(Phellinus igniarius)，是銹革孔菌科(Hymenochaetaceae)、針層孔菌屬(Phellinus)的真菌，具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌、消炎、增強(qiáng)免疫等藥理活性。桑黃是目前國(guó)際公認(rèn)的生物抗癌領(lǐng)域中效果排在第一位的藥用菌，是國(guó)際醫(yī)藥界與保健品行業(yè)抗癌產(chǎn)品的生產(chǎn)原料，市場(chǎng)潛力巨大。

桑黃在自然界中很難形成桑黃子實(shí)體，并且人工栽培技術(shù)還不成熟，這些都是影響桑黃產(chǎn)量的重要因素。目前，桑黃的液體發(fā)酵技術(shù)已經(jīng)成熟，可以生產(chǎn)出大量的菌絲體用于獲得桑黃菌絲多糖。多糖作為桑黃真菌一種非常重要的活性物質(zhì)，其具有非常好的藥效作用?，F(xiàn)代科學(xué)研究證實(shí)，桑黃多糖的藥理活性主要有抗腫瘤、抗癌、抗突變、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化、抗衰老等。桑黃多糖作為活性物質(zhì)，在桑黃多糖的提取過(guò)程中，保持多糖的活性就尤為重要。

目前提取桑黃多糖的方法主要有熱水浸提法、超聲破碎法、酶解法、超聲輔助復(fù)合酶法等，其中熱水浸提法的提取溫度一般為90～100℃，雖然可提高多糖得率，但得到的多糖活性明顯降低；超聲破碎法在合適的超聲功率條件下，可以破碎細(xì)胞壁從而提高多糖得率，但由于在操作過(guò)程中剪切力過(guò)大，往往導(dǎo)致部分多糖分子結(jié)構(gòu)破壞，進(jìn)而使多糖活性明顯降低；酶解法提取成本較高，不適合工業(yè)生產(chǎn)中大量提取多糖。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于克服現(xiàn)有桑黃多糖提取方法存在的桑黃多糖活性低的問(wèn)題，提供一種操作簡(jiǎn)單，能很好保持多糖活性的低溫低壓提取高活性桑黃多糖的方法。

解決上述問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：將桑黃菌絲體與水按料液比為1g:40～60mL混合均勻，在壓力為-0.04～-0.07MPa、溫度為50～60℃下提取1～3小時(shí)，離心分離，上清液用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇水溶液在4℃下醇沉12小時(shí)，得到活性桑黃多糖。

本發(fā)明優(yōu)選將桑黃菌絲體與水按料液比為1g:50mL混合均勻，在壓力為-0.04～-0.07MPa、溫度為60℃下提取2小時(shí)，離心分離，上清液用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇水溶液在4℃下醇沉12小時(shí)，得到活性桑黃多糖。

本發(fā)明最佳選擇將桑黃菌絲體與水按料液比為1g:50mL混合均勻，在壓力為-0.06MPa、溫度為60℃下提取2小時(shí)，離心分離，上清液用體積分?jǐn)?shù)為80％的乙醇水溶液在4℃下醇沉12小時(shí)，得到活性桑黃多糖。

本發(fā)明在低壓條件下進(jìn)行桑黃多糖提取，使得桑黃菌絲體細(xì)胞壁破裂溶出多糖，從而提高多糖產(chǎn)量，在此過(guò)程中，沒(méi)有物理剪切力破壞多糖結(jié)構(gòu)，又在較低的溫度環(huán)境中保護(hù)了多糖活性結(jié)構(gòu)，使得提取得到的桑黃多糖以最佳的活性結(jié)構(gòu)溶于提取液中，從而獲得了高活性的桑黃多糖。

附圖說(shuō)明

圖1是葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線。

圖2是Trolox標(biāo)準(zhǔn)曲線。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不僅限于這些實(shí)施例。

下面實(shí)施例中的桑黃菌絲體按下述方法制備而成：

1、菌株活化

配制一級(jí)種子培養(yǎng)基(2％葡萄糖、25％土豆、1％MgSO₄、1％KH₂PO₄、1.3％蘆丁、0.2％CaCl₂、0.2％硫酸亞鐵、pH值為6.5)，取保存的菌種斜面，挑取3～4塊桑黃菌絲塊接種于一級(jí)種子培養(yǎng)基中，250mL搖瓶裝液量50mL、溫度28℃、轉(zhuǎn)速160rpm，培養(yǎng)10天，得到一級(jí)種子；配制二級(jí)種子培養(yǎng)基(2％葡萄糖、25％土豆、1％MgSO₄、1％KH₂PO₄、0.2％CaCl₂、0.2％硫酸亞鐵、pH值為6.5)，取一級(jí)種子接種于二級(jí)種子培養(yǎng)基中，250mL搖瓶裝液量80mL、接種量10％、溫度28℃、轉(zhuǎn)速160rpm，培養(yǎng)6天，得到二級(jí)種子。

2、桑黃菌絲發(fā)酵