[發明專利]鐮刀菌單端孢霉烯族B類毒素PCR檢測引物及其應用有效
| 申請號： | 201510001950.0 | 申請日： | 2015-01-05 |
| 公開（公告）號： | CN104561307B | 公開（公告）日： | 2017-01-18 |
| 發明（設計）人： | 仇劍波;董飛;徐劍宏;史建榮 | 申請（專利權）人： | 江蘇省農業科學院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 江蘇圣典律師事務所32237 | 代理人： | 楊文晰,孫忠浩 |
| 地址： | 210014 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 鐮刀 菌單端孢霉烯族 類毒素 pcr 檢測 引物 及其 應用 | ||
1.一組鐮刀菌單端孢霉烯族B類毒素PCR檢測引物，包括如SEQ?ID?NO.1所示的共用上游引物F，如SEQ?ID?NO.2所示的3-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇下游引物R1，如SEQ?ID?NO.3所示的15-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇下游引物R2，如SEQ?ID?NO.4所示的雪腐鐮刀菌烯醇下游引物R3。
2.如權利要求1所述鐮刀菌單端孢霉烯族B類毒素PCR檢測引物在PCR檢測3-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、15-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇以及雪腐鐮刀菌烯醇中的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述PCR檢測是指：以被檢測材料DNA為模板，進行PCR反應，對PCR反應產物進行凝膠電泳，電泳產物中若出現376bp特異性條帶，則檢測材料中含有3-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇；若電泳產物中出現443bp特異性條帶，則檢測材料中含有15-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇；若電泳產物中出現246bp特異性條帶，則檢測材料中含有雪腐鐮刀菌烯醇。
4.根據權要求3所述的應用，其特征在于，所述PCR反應的反應體系為：50ng模板DNA，2.5μL?10×PCR?Buffer緩沖液，1.25mM的dNTPs?1μL?，Taq?DNA聚合酶0.3μL?，10μM的共用上游引物F?0.6μL，10μM的3-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇下游引物R1、10μM的15-乙酰基脫氧雪腐鐮刀菌烯醇下游引物R2?、10μM的雪腐鐮刀菌烯醇下游引物R3各0.2μL，ddH20補足至20μL；
PCR反應條件：94℃?5min;?94℃?30s，58℃?30s，72℃?30s，30個循環；72℃?10min。
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