[發明專利]用于提供含佐劑病毒體的方法及由此可獲得的含佐劑病毒體

有效

• 申請號: 201480082887.1
• 申請日: 2014-09-12
• 公開（公告）號: CN107073105B
• 公開（公告）日: 2021-04-06
• 發明（設計）人: 安東尼厄斯·約翰內斯·亨里克斯·施特格曼;瓊·克勞迪亞·莫琳·索埃-肯·宗
• 申請（專利權）人: 巴斯特威爾控股有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/12;A61K39/155;A61K39/245;A61K39/145;A61K39/00;A61P31/12;A61P31/16;A61P31/22;A61P35/00
• 代理公司: 北京康信知識產權代理有限責任公司 11240
• 代理人: 張英;宮傳芝

1.一種用于制備含佐劑病毒體的方法，包括以下步驟：

(i)提供包含膜融合蛋白的非含佐劑病毒體的水性組合物；

(ii)將兩親性佐劑溶解于可以與水形成均勻混合物的藥用非水溶劑；以及

(iii)在所述水性組合物中稀釋所述兩親性佐劑的溶液以誘導在病毒體膜的外小葉中插入佐劑，同時保持病毒體的膜融合活性。

2.根據權利要求1所述的方法，其中，所述非水溶劑在20℃下具有至少5g/100mL的在水中的溶解度。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述非水溶劑是水可混溶的溶劑。

4.根據權利要求1或2所述的方法,其中，所述非水溶劑選自由乙腈、2-丁醇、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸、甲酸、甲醇、乙醇、DMSO、DMF、正丙醇、異丙醇、2-甲基-1-丙醇和THF、或它們的任何混合物組成的組。

5.根據權利要求4所述的方法，其中，所述非水溶劑是DMSO或DMF。

6.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述膜融合蛋白是病毒融合蛋白。

7.根據權利要求6所述的方法，其中，所述膜融合蛋白是RSV F蛋白。

8.根據權利要求1或2所述的方法，包括通過包膜病毒的功能重組來制備病毒體。

9.根據權利要求8所述的方法，其中，所述功能重組包括使包膜病毒接觸含有短鏈磷脂或去污劑的溶液，使得所述病毒的病毒包膜溶解，進一步包括從所述溶液去除短鏈磷脂或去污劑，使得形成功能重組的病毒包膜。

10.根據權利要求9所述的方法，其中，所述短鏈磷脂具有大于0.1mM的臨界微團濃度。

11.根據權利要求10所述的方法，其中，所述短鏈磷脂是磷脂酰膽堿。

12.根據權利要求9所述的方法，其中，所述去污劑是八乙二醇單正十二烷基醚。

13.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述兩親性佐劑是由Toll樣受體識別的化合物。

14.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述兩親性佐劑是糖脂。

15.根據權利要求1或2所述的方法，其中，所述兩親性佐劑是兩親性肽。

16.根據權利要求1所述的方法，其中，所述病毒體包含至少一種另外的抗原。

17.根據權利要求16所述的方法，其中，所述抗原是病毒抗原。

18.根據權利要求16或17所述的方法，其中，所述抗原是膜內在蛋白或附接至膜錨定部分的抗原。

19.根據權利要求18所述的方法，其中，所述膜錨定部分是跨膜域或膜錨定氨基酸序列。

20.根據權利要求18所述的方法，其中，所述膜錨定部分是脂質部分。

21.根據權利要求6所述的方法，其中，所述膜融合蛋白選自由HIVgp120/gp41蛋白、副粘病毒F蛋白和流感病毒血凝素蛋白、桿狀病毒的gp64蛋白、塞姆利基森林病毒的E蛋白組成的組。