[發明專利]口腔生物膜模型及其用途

在審

• 申請號: 201480082456.5
• 申請日: 2014-10-06
• 公開（公告）號: CN106795472A
• 公開（公告）日: 2017-05-31
• 發明（設計）人: 盧恰娜·林奧迪馬龍;R·薩利文;大衛·蘇里亞諾;阿爾蒂·賴格;拉爾夫·彼得·圣塔爾皮亞三世
• 申請（專利權）人: 高露潔-棕欖公司
• 主分類號: C12M1/12
• 分類號: C12M1/12;C12Q1/18
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司11227
• 代理人: 鄭斌,張福譽

背景技術

生物膜被定義為嵌入細胞外聚合物的基質中的固著群落，其特征在于不可逆地附著至表面或彼此的細胞。生物膜群落可由單一種類的微生物形成，但在自然界中，生物膜幾乎總是由許多細菌種類的混合物組成。例如，在典型的牙菌斑生物膜中已鑒定了超過500種細菌物種。

體內牙菌斑的起始和生長以及生物膜一般而言由幾個階段組成，并且是由生物和物理化學來源的許多因素決定的復雜過程。流體動力學也在細菌附著和生物膜形成中起作用。在哺乳動物中的生物膜形成的早期階段，例如，表面形貌也可能是決定細菌對表面的粘附的主要因素。由于粗糙表面的表面積增加，粗糙表面在給定時間段內可能趨于積累比平滑表面更多的細菌。

然而，可用于評估生物膜形成的體外口腔生物膜模型并未考慮唾液流動和剪切條件。相應地，這種模型更適于研究牙周病原體，而不是研究菌斑相關病原體和菌斑形成。此外，使用常規體外生物膜模型的研究已證明增加的表面粗糙度和增加的生物膜積累之間無關聯。因此，仍然需要允許對牙齒或植入物表面上的生物膜形成的更真實分析的口腔生物膜模型，以及用于評估拋光制劑的方法。

發明內容

本公開內容涉及包括下述的口腔生物膜模型：包括第一表面、第二表面和固定地附著至第一表面的多個樣本的基底，其中口腔生物膜能夠在樣本上形成，并且其中多個樣本中的至少一個的表面粗糙度小于或大于多個中的至少第二樣本的表面粗糙度；以及具有限定容器的側面和底部的本體，本體適于接納基底和多個樣本，并且還適于接納流體。

在另一個方面，本公開內容涉及用于生長口腔生物膜的方法，所述方法包括：在基底上提供至少第一樣本和第二樣本，其中第一樣本包括的表面粗糙度小于或大于第二樣本的表面粗糙度，其中口腔生物膜能夠在樣本上形成；提供包括液體生長培養基的容器，其中所述液體生長培養基包括能夠進行口腔生物膜生產的微生物；攪動液體生長培養基；將包括至少第一樣本和第二樣本的基底懸浮在容器中；并且使至少第一樣本和第二樣本與包括微生物的液體生長培養基一起溫育，由此在至少第一樣本和第二樣本上形成生物膜。

在另外一個方面，本公開內容涉及用于鑒定用于降低或抑制生物膜形成的試劑的方法，所述方法包括：在基底上提供至少第一樣本和第二樣本，其中第一樣本包括的表面粗糙度小于或大于第二樣本的表面粗糙度，其中口腔生物膜能夠在樣本上形成；提供包括液體生長培養基的容器，其中所述液體生長培養基包括能夠進行牙齒生物膜生產的微生物；使至少第一樣本與測試試劑接觸；攪動液體生長培養基；使與測試試劑接觸后的至少第一樣本和第二樣本懸浮于容器中；使與測試試劑接觸后的至少第一樣本和第二樣本與包括微生物的液體生長培養基一起溫育；并且比較在至少第一樣本和第二樣本上形成的生物膜的量，其中與至少第二樣本上的生物膜形成量相比較，至少第一樣本上的生物膜形成的量減少指示測試試劑降低或抑制生物膜形成。

本公開內容的進一步適用范圍根據下文提供的詳細描述將變得顯而易見。應當理解詳細描述和具體實例雖然指示本公開內容的優選實施例，但預期僅用于舉例說明性目的，并且不預期限制本公開內容的范圍。

附圖說明

本公開內容根據詳細描述和附圖將得到更充分地理解，其中：

圖1描繪了容器的實施例。

圖2描繪了容器和基底的實施例。

圖3描繪了嵌入樣本的基底的實施例。

圖4a描繪了三格研究的分層：用美白牙膏刷過的牙釉質相對于粗糙牙釉質相對于拋光牙釉質。圖4b描繪了兩格研究的分層：用敏感牙膏刷過的牙釉質相對于粗糙牙釉質。

圖5顯示了在100X放大率下的牙釉質表面的代表性共焦圖像。圖5a：酸蝕刻的牙釉質，圖5b：拋光的牙釉質，圖5c：用測試美白牙膏刷過的酸蝕刻的牙釉質，圖5d：用測試敏感牙膏刷過的酸蝕刻的牙釉質。

圖6顯示了在牙釉質塊上經過6小時對表面積標準化的總細菌積累。

圖7顯示了在牙釉質塊上經過6小時對表面積標準化的總細菌積累。

具體實施方式

下述描述本質上僅是示例性的，并且決不預期限制本公開內容、其應用或用途。

如自始至終使用的，范圍用作描述在范圍內的每個和每一個值的簡寫。可選擇范圍內的任何值作為范圍的終點。另外，本文引用的所有參考文獻均以引用的方式在此全文并入。在本公開內容中的定義和引用的參考文獻的定義沖突的情況下，以本公開內容為準。

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